[发明专利]一种测定丙半胱氨酸含量的HPLC检测方法在审
申请号: | 202111648786.4 | 申请日: | 2021-12-30 |
公开(公告)号: | CN114354796A | 公开(公告)日: | 2022-04-15 |
发明(设计)人: | 宗蜜蜜;孙熠昂;王佩;王晴 | 申请(专利权)人: | 江苏新河农用化工有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86 |
代理公司: | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人: | 边人洲 |
地址: | 221400 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 测定 半胱氨酸 含量 hplc 检测 方法 | ||
1.一种测定丙半胱氨酸含量的HPLC检测方法,其特征在于,所述测定丙半胱氨酸含量的HPLC检测方法包括以下步骤:将丙半胱氨酸标样配制成的标准工作溶液与丙半胱氨酸试样配制成的待测样品溶液以水和乙腈为流动相采用C18反相色谱柱进行HPLC检测,根据检测结果经过计算得到待测样品中丙半胱氨酸的含量。
2.根据权利要求1所述的测定丙半胱氨酸含量的HPLC检测方法,其特征在于,所述标准工作溶液的制备方法包括以下步骤:将丙半胱氨酸标样与溶剂混合,震荡溶解并定容,得到标准工作溶液;
优选地,所述溶剂包括纯水。
3.根据权利要求1或2所述的测定丙半胱氨酸含量的HPLC检测方法,其特征在于,所述标准工作溶液的浓度为2.0-4.0mg/mL。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的测定丙半胱氨酸含量的HPLC检测方法,其特征在于,所述待测样品溶液的制备方法包括以下步骤:将丙半胱氨酸试样用溶剂稀释,在超声下震荡溶解,得到所述待测样品溶液;
优选地,所述溶剂包括纯水;
优选地,所述待测样品溶液的浓度为2.0-4.0mg/mL。
5.根据权利要求4所述的测定丙半胱氨酸含量的HPLC检测方法,其特征在于,所述超声的频率为35-40kHz;
优选地,所述超声的时间为3-8min;
优选地,所述震荡溶解后还进行冷却,所述冷却至温度为20-30℃。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的测定丙半胱氨酸含量的HPLC检测方法,其特征在于,所述C18反相色谱柱的规格为150×4.6mm,填料粒径为5μm;
优选地,所述C18反相色谱柱的柱温为30-40℃。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的测定丙半胱氨酸含量的HPLC检测方法,其特征在于,所述HPLC检测中,检测波长为205-215nm。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的测定丙半胱氨酸含量的HPLC检测方法,其特征在于,所述HPLC检测中,柱流速为0.8-1.2mL/min。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的测定丙半胱氨酸含量的HPLC检测方法,其特征在于,所述HPLC检测中,进样量为10-20μL。
10.根据权利要求1-9中任一项所述的测定丙半胱氨酸含量的HPLC检测方法,其特征在于,所述HPLC检测采用等度洗脱,流动相中水与乙腈的比例为(65-75):(25-35);
优选地,所述HPLC检测采用等度洗脱,流动相中水与乙腈的比例为70:30。
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