[发明专利]无促瘤功能的脑胶质瘤细胞来源外泌体及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种无促瘤功能的脑胶质瘤细胞来源外泌体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

向来源于脑胶质瘤细胞的外泌体悬液中加入皂素，进行孵育，使外泌体内部所携带的RNA和蛋白扩散出外泌体，清除外泌体内容物；

收集皂素处理后的外泌体，即获得无促瘤功能的脑胶质瘤细胞来源外泌体；

来源于脑胶质瘤细胞的外泌体悬液中，外泌体浓度范围为1×10⁷/mL～1×10¹²/mL；

向来源于脑胶质瘤细胞的外泌体悬液中加入皂素的量为：皂素在外泌体悬液中的质量浓度为2%～2.5%；

向来源于脑胶质瘤细胞的外泌体悬液中加入皂素后，孵育的条件为：室温下震荡孵育1h～1.5h。

2.根据权利要求1所述的一种无促瘤功能的脑胶质瘤细胞来源外泌体的制备方法，其特征在于，所述脑胶质瘤细胞选自胶质瘤细胞系U87、U251或GL260中的一种或几种；或，

所述脑胶质瘤细胞来源于基于其他目的或需求而脱离于人体的脑胶质瘤细胞。

3.根据权利要求1所述的一种无促瘤功能的脑胶质瘤细胞来源外泌体的制备方法，其特征在于，来源于脑胶质瘤细胞的外泌体悬液中，外泌体浓度范围为1×10¹⁰/mL。

4.根据权利要求1所述的一种无促瘤功能的脑胶质瘤细胞来源外泌体的制备方法，其特征在于，向来源于脑胶质瘤细胞的外泌体悬液中加入皂素后，孵育的条件为：37℃下震荡孵育1h～1.5h。

5.根据权利要求1所述的一种无促瘤功能的脑胶质瘤细胞来源外泌体的制备方法，其特征在于，收集皂素处理后的外泌体的方法为：用生物相容性介质稀释皂素处理后的外泌体悬液，再利用差速离心、密度梯度离心、超滤、体积排阻色谱或切向流超滤方法中的一种或几种的组合来收集并提纯稀释液中的外泌体。

6.一种基于权利要求1-5中任一项所述方法获得的无促瘤功能的脑胶质瘤细胞来源外泌体，其特征在于，所述无促瘤功能的脑胶质瘤细胞来源外泌体中不携带脑胶质瘤细胞所携带的大部分RNA和蛋白。

7.一种如权利要求6所述的无促瘤功能的脑胶质瘤细胞来源外泌体的应用，其特征在于，所述无促瘤功能的脑胶质瘤细胞来源外泌体作为制备治疗脑胶质瘤药物的应用。

8.根据权利要求7所述的无促瘤功能的脑胶质瘤细胞来源外泌体的应用，其特征在于，所述无促瘤功能的脑胶质瘤细胞来源外泌体作为负载脑胶质瘤治疗药物的纳米药物递送载体。

9.一种脑胶质瘤治疗药物，其特征在于，包括权利要求6所述的无促瘤功能的脑胶质瘤细胞来源外泌体，以及所述无促瘤功能的脑胶质瘤细胞来源外泌体内负载的脑胶质瘤治疗药物。