[发明专利]卷曲蛋白质7在增强肠道屏障保护功能中的应用

说明书

本发明公开了卷曲蛋白质7在增强肠道屏障保护功能中的应用。本发明通过诱导表达纯化获得了猪源重组卷曲蛋白质7(FZD7)，发现其可结合赖氨酸和Iturin A，可用于提高氨基酸的利用率，促进氨基酸的吸收。而FZD7可通过结合Iturin A上调Wnt/β‑catenin信号通路，增加肠道干细胞的增殖活性，促进受损屏障的快速修复，缓解细菌对肠道的损伤，增强肠道屏障保护功能，使其免受细菌损害。本发明不仅发现了FZD7蛋白质的新功能，同时拓宽了猪FZD7蛋白质的应用范围。

技术领域

本发明属于分子生物技术领域。更具体地，涉及卷曲蛋白质7在增强肠道屏障保护功能中的应用。

背景技术

七次跨膜受体FZD(Frizzled，FZD)蛋白质家族是G蛋白偶联受体亚家族的成员之一，在动物发育过程中高度保守。哺乳动物FZD蛋白质家族共有10个成员，可分为四个亚家族，分别为FZD1/2/4/6/7亚家族、FZD5/8亚家族、FZD4亚家族和FZD9/10亚家族；大多数低等两侧对称动物仅含有四个FZD蛋白质家族成员。其中，卷曲蛋白质7(Frizzled7，FZD7)可与Wnt配体结合，抑制细胞质中β-catenin的磷酸化，然后β-catenin通过核膜，以Active β-catenin形式与TCF/LEF反应元件结合，调节经典Wnt信号通路活性。

目前关于FZD7的研究多集中于人源FZD7，研究发现FZD7在多种恶性肿瘤中被显著上调，其通过激活Wnt通路调控细胞增殖以及肿瘤细胞的侵袭与迁移，可作为抗癌药剂靶标用于开发抗癌药。例如专利“卷曲蛋白结合药剂及其应用”中就公开了一种可与人类卷曲受体结合的新型抗癌药剂。但不同物种来源的同种蛋白的功能可能不同，目前还未有关于猪源FZD7功能的报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有上述技术的缺陷和不足，提供卷曲蛋白质7(FZD7)的新应用。

本发明的第一个目的是提供所述卷曲蛋白质7在增强肠道屏障保护功能中的应用。

本发明第二个目的是提供所述卷曲蛋白质7在制备增强肠道屏障保护功能的产品中的应用。

本发明第三个目的是提供所述卷曲蛋白质7在提高氨基酸利用率中的应用。

本发明第四个目的是提供所述卷曲蛋白质7在促进氨基酸吸收中的应用。

本发明第五个目的是提供所述卷曲蛋白质7在制备促氨基酸吸收的产品中的应用。

本发明上述目的通过以下技术方案实现：

本发明利用GenBank数据库中猪FZD7蛋白质的编码序列设计引物，通过PCR扩增获得了编码猪FZD7成熟肽的核苷酸片段，所得猪FZD7成熟肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，编码猪FZD7成熟肽的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。在此基础上，本发明通过构建重组FZD7表达载体，将猪FZD7成熟肽与组氨酸(His)标签进行融合表达，获得了重组FZD7蛋白质。

本发明发现重组FZD7蛋白质可结合赖氨酸和伊枯草菌素A(Iturin A)，提高氨基酸的利用率，促进氨基酸的吸收；FZD7可通过结合Iturin A上调Wnt/β-catenin信号通路，增加肠道干细胞增殖活性，促进受损屏障快速修复，缓解细菌对肠道的损伤，增强肠道屏障保护功能，使其免受细菌损害。因此，本发明申请保护卷曲蛋白质7或其编码基因的以下应用：

本发明申请保护卷曲蛋白质7在增强肠道屏障保护功能中的应用。

本发明申请保护卷曲蛋白质7在制备增强肠道屏障保护功能的产品中的应用。

本发明申请保护卷曲蛋白质7在提高氨基酸利用率中的应用。

本发明申请保护卷曲蛋白质7在促进氨基酸吸收中的应用。

本发明申请保护所述卷曲蛋白质7在制备促氨基酸吸收的产品中的应用。