[发明专利]一种发酵生产苹果酸的方法

权利要求书

1.一种发酵生产苹果酸的方法，其特征在于，所述方法通过在发酵过程中交替进行需氧发酵和厌氧发酵，制备得到含有苹果酸的发酵液。

2.根据权利要求1所述的发酵生产苹果酸的方法，其特征在于，所述方法先进行需氧发酵，至发酵中期时，由需氧发酵转为厌氧发酵，之后交替进行需氧发酵和厌氧发酵，至发酵结束；优选地，所述发酵中期为需氧发酵50-70h时，进一步优选为需氧发酵64h时。

3.根据权利要求1或2所述的发酵生产苹果酸的方法，其特征在于，所述方法在发酵的中后期，由厌氧发酵转为需氧发酵的条件为：发酵液每小时耗糖量小于1.155g/L；之后，由需氧发酵转为厌氧发酵的条件为：发酵液每小时耗糖量大于1.175g/L。

4.根据权利要求1所述的发酵生产苹果酸的方法，其特征在于，所述需氧发酵的过程中，控制发酵液中的溶氧量为10％-30％；优选地，所述控制溶氧量采用控制通风比、搅拌转速的方式，所述通风比为1：(0.1-0.3)V/V·m，所述搅拌转速为200-500rpm。

5.根据权利要求1所述的发酵生产苹果酸的方法，其特征在于，所述发酵的菌株为嗜热菌，优选嗜热毁丝霉，所述嗜热毁丝霉选自野生型菌株或基因工程菌株。

6.根据权利要求1或5所述的发酵生产苹果酸的方法，其特征在于，所述发酵的过程中控制发酵温度为40-50℃。

7.据权利要求1或5所述的发酵生产苹果酸的方法，其特征在于，所述发酵的过程中控制发酵罐压强为0.02-0.05MPa。

8.根据权利要求1或5所述的发酵生产苹果酸的方法，其特征在于，所述发酵的接种量为2-10％(v/v)。

9.根据权利要求1或5所述的发酵生产苹果酸的方法，其特征在于，所述发酵的培养基每升由以下组分组成：葡萄糖180-250g，豆粕粉150-200g，K₂HPO₄ 0.1-0.3g，KH₂PO₄ 0.1-0.3g，MgSO₄·7H₂O 0.05-0.2g，生物素0.1-0.3mg，苹果酸0.01-0.1g，NaCl 0.05-0.1g，ZnSO₄·7H₂O 0.05-0.2g，FeSO₄·7H₂O 0.1-0.2g，水为溶剂。

10.根据权利要求9所述的发酵生产苹果酸的方法，其特征在于，所述发酵的培养基每升由以下组分组成：葡萄糖220g，豆粕粉180g，K₂HPO₄ 0.15g，KH₂PO₄ 0.15g，MgSO₄·7H₂O0.1g，生物素0.2mg，苹果酸0.05g，NaCl 0.08g，ZnSO₄·7H₂O 0.1g，FeSO₄·7H₂O 0.15g，自来水为溶剂；和/或，所述发酵的过程中无需补加培养基。