[发明专利]一种碳点组合物、制备方法以及在细胞核、膜共染中的应用

说明书

本发明公开了一种碳点组合物、制备方法以及在细胞核、膜共染中的应用，将苯三胺碳点与苯二胺碳点按质量比1：1混合，即可实现细胞核、膜共染，其中苯三胺碳点实现对细胞核的染色，苯二胺碳点实现对细胞质的染色，两者结合能实现整个细胞染色，操作简单，成本低。

技术领域

本发明涉及一种染色试剂，具体涉及一种碳点组合物、制备方法以及在细胞核、膜共染中的应用。属于碳纳米材料技术领域。

背景技术

细胞是生命活动中的重要载体，对细胞和外源物质的研究能够帮助我们了解细胞的运输、代谢以及毒性。其中细胞核对于细胞的诸多过程尤为重要，比如代谢、传代与遗传等。然而，相对于细胞核的至关重要性来说，对其研究却是相对缺乏的。对细胞核的染色是第一个步骤，他能够显示出细胞核的形态，这之后才能研究细胞核的运输以及转运试剂到细胞核的情况。随着荧光显微技术的飞速发展，由于其可视化和高分辨特性，对细胞核的荧光染色就变得极为普遍。现在被普遍使用的细胞核荧光染料存在一定的缺陷，比如DAPI和Hoechst，它们存在自猝灭和易被光漂白的缺点，其中DAPI还有一定的细胞毒性。因此，开发能够特异性染色细胞核的新型荧光染料具有重要的意义。

碳点作为一种新型的荧光纳米材料已被广泛报道，并且有极为广泛的应用，比如细胞成像，生物传感，光电材料等领域。目前现有技术中碳点在被用于细胞成像时，由于材料的尺寸、表面电荷等性质，很难应用于细胞核的成像，大多数发明的碳点只能进入细胞的细胞质、线粒体等部位，且需要较长的孵育时间。

因此，开发一种快速且特异性的对整个细胞进行染色的荧光染料具有重要的意义。

发明内容

本发明的目的是为克服上述现有技术的不足，提供一种碳点组合物、制备方法以及在细胞核、膜共染中的应用，可用于细胞核、膜共染，其染色速度快，成本低。

为实现上述目的，本发明采用下述技术方案：

1、一种碳点组合物，是将苯三胺碳点和苯二胺碳点按质量比1：1混合而得，其中，苯三胺碳点是以1,2,4-三氨基苯胺二盐酸盐为碳源，采用电化学法制备得到，其最大紫外吸收波长为503nm，最大荧光激发波长为503nm，最大发射波长为637nm；苯二胺碳点是以邻苯二胺为碳源，采用电化学法制备得到，其最大荧光激发波长为294nm，最大发射波长为410nm。

2、上述一种碳点组合物的制备方法，具体步骤如下：

(1)先将1,2,4-三氨基苯胺二盐酸盐加入超纯水中，接着滴加硫酸钾溶液，超声波分散均匀，然后在电解装置中电解5～20分钟，后处理，得到苯三胺碳点；

(2)再将邻苯二胺溶于硫酸钠溶液中，接着在电解装置中电解10～20分钟，得到苯二胺碳点；

(3)最后将苯三胺碳点与苯二胺碳点混匀，即得所述的一种碳点组合物。

优选的，步骤(1)中，1,2,4-三氨基苯胺二盐酸盐、超纯水、硫酸钾溶液的用量比为1mg：20mL：500μL，硫酸钾溶液的浓度为2mol/L。

优选的，步骤(1)中，电解的工艺条件为：电压10V，电流0.05A。

优选的，步骤(1)中，后处理工艺为将电解产物在截留分子量600Da的透析袋中透析12～20小时，且每4小时更换一次超纯水。

优选的，步骤(2)中，邻苯二胺、硫酸钠溶液的用量比为0.01g：20mL，硫酸钠溶液的浓度为1mol/L。

优选的，步骤(2)中，电解的工艺条件为：电压10V，电流0.05A。

3、上述一种碳点组合物在细胞核、膜共染中的应用。

本发明的有益效果：