[发明专利]基于CRISPR/Cas9构建Ets2基因超级增强子敲除动物模型的方法及其应用在审
| 申请号： | 202111674779.1 | 申请日： | 2021-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN114958908A | 公开（公告）日： | 2022-08-30 |
| 发明（设计）人： | 秦利涛;张倩;郭正隆;郝冰涛;王红丹;张晓梅;王鑫;康冰;张安 | 申请（专利权）人： | 河南省人民医院 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/89;C12N15/113;C12N15/12;C12N15/55;A01K67/027 |
| 代理公司： | 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) 11427 | 代理人： | 宫建华 |
| 地址： | 450000 *** | 国省代码： | 河南;41 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 基于 crispr cas9 构建 ets2 基因 超级 增强 动物 模型 方法 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1.基于CRISPR/Cas9构建Ets2基因超级增强子敲除动物模型的方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)靶向小鼠SEts2序列的gRNA设计：
根据SEts2序列设计一对相应的gRNA，所述gRNA的序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示；
所述靶SEts2序列位于小鼠Chr16:95721049-95979933区域；
2)gRNA制备并显微注射获得F0小鼠：
将步骤1)中的一对gRNA进行纯化，并与cas9质粒共同注射小鼠胚胎，获得F0代小鼠；
3)鉴定SEts2基因型，筛选出阳性F0代小鼠；
4)阳性F0代小鼠与野生型小鼠杂交得到F1代小鼠，F1代杂合小鼠自交获得纯合后代，从而构建得到SEts2敲除的动物模型。
2.根据权利要求1所述敲除动物模型的方法，其特征在于，所述步骤3)用于SEts2基因型鉴定的引物包括公用上游引物和两条下游引物，所述上游引物序列如SEQ ID NO.3所示，所述下游引物序列如SEQ ID NO.4和EQ ID NO.5所示。
3.一种SEts2敲除的动物模型，其特征在于，由权利要求1或2所述方法构建得到。
4.权利要求3所述动物模型可以在多个器官发育过程中研究超级增强子对Ets2基因调控的机制。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于河南省人民医院，未经河南省人民医院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202111674779.1/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
