[发明专利]一种生物分子或细胞捕获芯片的质控方法

说明书

本发明公开了一种生物分子或细胞捕获芯片的质控方法，包括：将待包被到捕获芯片上的抗体的标准品按照不同的浓度梯度配制一系列标准液，分别包被在微孔板的孔内，然后加入酶标记二抗反应，加入显色液显色反应，测试各个孔的吸光度，建立抗体浓度和吸光度的标准曲线；在同一批次的制作好的捕获芯片中抽样选取多个捕获芯片，分别使各捕获芯片和酶标记二抗反应，加入显色液显色反应，测试捕获芯片的吸光度，根据所述标准曲线获知各捕获芯片上的抗体量，计算平均抗体量，将所述平均抗体量与第一阈值比较，若大于或等于所述第一阈值，则判定该批捕获芯片合格；若小于所述第一阈值，则判定该批捕获芯片不合格。本发明的检测结果较为准确可靠。

技术领域

本发明属于生物检测技术领域，涉及一种生物分子或细胞捕获芯片的质控方法，具体是一种CTC捕获筛网的质控方法。

背景技术

目前，微流控技术已应用于CTC细胞(循环肿瘤细胞)分选，其中捕获芯片是重要的组成元件，其中的一种捕获芯片为包被有能够和目标分子或细胞特异性结合的抗体的网状芯片。江苏汇先医药技术有限公司的CytoBot2000仪所使用的一次性耗材TIP头即内置这种网状芯片，网状芯片表面结合有高分子涂层及低浓度的捕获抗体。CTC细胞网状捕获芯片的质控标准决定了该产品的稳定性，直接影响细胞富集分选的效果。

目前，对CTC细胞网状捕获芯片上的捕获抗体进行质控采用间接的方式实现，其主要过程为预染一定数量肿瘤细胞并混入固定数量的PBMC(外周血单个核细胞)细胞背景或细胞系背景(例如：Jurkat等)制备模拟样本；对模拟样本进行上机检测，完成检测后对CTC细胞网状捕获芯片上的目标细胞进行计数统计，最终通过比对检测结果与标准合格品的统计学数据判读QC结论。该质控过程中引入了诸多变量，例如：不同供试者来源的PBMC细胞背景或不同代数不同传代周期的细胞系背景(例如：Jurkat等)的理化性质波动较大；不同代数不同传代周期的捕获目的细胞系(例如：MCF-7，SKBR3，T-24等)的理化性质波动较大等。基于上述因素，历史的QC质控结果难以精确的对于CTC细胞网状捕获芯片进行质控。

现行CTC细胞网状捕获芯片的QC质控是基于直接测试对目标细胞的捕获效率并于历史产品合格的捕获效率及方差、标准差等统计学数据进行平行对比，若抽样产品的各项数据优于或等于历史合格产品，则认为该批次产品为合格产品。这种质控存在诸多弊端，且在产品不合格时难以排除，差品产生的因素，因此需要对现有质控方案进行优化调整。现有质控方法在网状芯片生产加工过程中仅对抗体捕获浓度，操作流程及捕获抗体包被时间进行严格标定，忽略了结合至芯片上的捕获抗体的数量、活性、效价对产品稳定性的影响。

发明内容

针对上述技术问题中的至少一个，本发明的目的是提供一种生物分子或细胞捕获芯片的质控方法，检测结果较为准确可靠。

根据本发明的一个方面，一种生物分子或细胞捕获芯片的质控方法，包括抗体效价检测步骤和捕获芯片的抗体含量检测步骤，

抗体效价检测步骤包括：将待包被到捕获芯片上的抗体的标准品按照不同的浓度梯度配制一系列标准液，分别包被在微孔板的孔内，然后加入酶标记二抗反应，加入显色液显色反应，测试各个孔的吸光度，建立抗体浓度和吸光度的标准曲线；

捕获芯片的抗体含量检测步骤包括：在同一批次的制作好的捕获芯片中抽样选取多个捕获芯片，分别使各捕获芯片和酶标记二抗反应，加入显色液显色反应，测试捕获芯片的吸光度，根据所述标准曲线获知各捕获芯片上的抗体量，计算平均抗体量，将所述平均抗体量与第一阈值比较，若大于或等于所述第一阈值，则判定该批捕获芯片合格；若小于所述第一阈值，则判定该批捕获芯片不合格。