[发明专利]一种多肽中聚合物的检测方法

说明书

本发明公开了一种生长抑素中聚合物的检测方法，它是采用高效液相色谱法检测，具体步骤如下：a、制备供试品溶液；b、制备对照溶液；c、制备分子量标准溶液；d、采用如下色谱条件分别对供试品溶液、对照溶液、分子量标准溶液进行检测。本发明方法检测可以将生长抑素与聚合物有效分离，准确测定生长抑素中聚合物含量，测定结果可靠，专属性强，灵敏度高，准确度，线性良好，可以有效控制生长抑素的产品质量。

技术领域

本发明涉及多肽中聚合物的检测，具体涉及一种生长抑素中聚合物的检测方法，属于医药领域。

背景技术

生长抑素是一种典型的脑肠肽，是由下丘脑释放的，能够抑制垂体生长激素的释放。生长抑素的药物制剂临床常用于消化道出血，肝硬化，静脉曲张，胰腺炎。

生长抑素储存过程中会有聚合物产生，其是一类物质，非特定化合物。影响产品质量，如是共价键形成的聚合物，则可能存在较大免疫原性风险，给患者用药造成巨大隐患。目前，国内外生长抑素原料药的质量标准中均无聚合物检测项目。

发明内容

为了有效控制生长抑素的质量品质，本发明提供了一种生长抑素中聚合物的检测方法，它是采用高效液相色谱法检测，具体步骤如下：

a、取待测生长抑素，加流动相溶解，得供试品溶液；

b、取步骤a所得供试品溶液，用流动相稀释100～500倍，得对照溶液；

c、取生长抑素对照品，加流动相溶解，得分子量标准溶液；取流动相作为空白溶液；

d、采用如下色谱条件分别对供试品溶液、对照溶液、分子量标准溶液和空白溶液进行检测：

固定相：以分子量的球状亲水改性硅胶为填充剂；

流动相：体积比0.04：23～27：77～73的三氟乙酸-乙腈-水；

流速：0.3～0.7ml/min；

波长：220nm。

进一步地，步骤a)所述待测生长抑素与流动相的质量体积比为5～15mg：20ml，优选10mg：20ml。

进一步地，步骤b)所述用流动相稀释200倍。

进一步地，步骤c)所述生长抑素对照品加0.8～5倍量流动相溶解，优选加1倍量流动相溶解；或：步骤c)所述生长抑素对照品，加2倍量流动相溶解，80℃水浴24h。

进一步地，所述的固定相为TSK-GEL G2000SWxl柱，色谱柱规格7.8mm×300mm，5μm。

进一步地，步骤d)所述色谱条件中流速为0.5ml/min，柱温为30℃，进样量10μl。

进一步地，步骤d)所述流动相为体积比0.05：25：75的三氟乙酸-乙腈-水。

进一步地，所述供试品溶液的色谱图中生长抑素色谱峰前，除溶剂峰，峰面积小于对照溶液色谱图中生长抑素色谱峰面积0.02倍的色谱峰外，其它色谱峰为聚合物色谱峰。

更进一步地，所述供试品溶液的色谱图中生长抑素色谱峰的理论板数不低于2000，生长抑素色谱峰与聚合物色谱峰的分离度不小于1.5，聚合物色谱峰面积总和不大于对照溶液色谱图中生长抑素色谱峰面积0.5％。

更进一步地，所述聚合物的含量按如下公式计算：

聚合物(％)＝A_聚合物/(A_对照×D)×100％

式中：A_聚合物为供试品溶液中聚合物峰面积；A_对照为对照溶液中生长抑素的峰面积；D为制备对照溶液时的稀释倍数。