[实用新型]外周血T细胞的分离装置

说明书

本实用新型属于生物医学技术领域，具体涉及外周血T细胞的分离装置，包括微流控芯片，微流控芯片开设有首尾串联的五个腔室，位于首段的腔室连接有进样槽，位于尾端的腔室连接有富集槽。本实用新型提供的外周血T细胞的分离装置，对预先分离的PBMC进行分步分离非目标细胞，从而实现对靶细胞的纯化，技术流程属于细胞的阴性富集法，因此分离全程不接触靶细胞，不会对靶细胞产生刺激，所以最大程度减少对靶细胞功能活性的影响。无需使用磁场分离，简化了流程，一次性微流控芯片装置，人工操作少，制造成本低，单次最多可分离25mL的全血样本，分离通量大。

技术领域

本实用新型属于生物医学技术领域，具体涉及外周血T细胞的分离装置。

背景技术

T淋巴细胞(T lymphocyte)简称T细胞，是由来源于骨髓的淋巴干细胞，在胸腺中分化、发育成熟后，通过淋巴和血液循环而分布到全身的免疫器官和组织中发挥免疫功能。

目前，T细胞的分离纯化方式主要分为以下几种：亲和板结合分离法、E花结形成分离法、补体介导的细胞毒分离法、尼龙毛分离法、磁珠分离法和流式细胞术分离法，其中以磁珠分离法法最为常用。磁珠分离法是利用偶联抗CD3、CD4和CD8抗体的磁珠进行总T细胞、CD4+细胞或CD8+T细胞的分离。但是存在如下不足：由于抗体结合了T细胞，对T细胞造成刺激，可能影响功能实验的准确性。磁珠和细胞的非特异性结合不可避免，因而磁珠分选法的分离纯度受限；分离纯度也受限于抗体的活性和特异性，对抗体的生产工艺、运输、保存、使用条件有较高要求；分离效果与磁铁的制造工艺和磁场稳定性密切相关，高质量磁铁需要进口且价格较高，且每个磁铁每次仅能分离1个样本，以上多个因素限制了实验的高通量开展。

实用新型内容

针对上述现有技术的不足，本实用新型提供了外周血T细胞的分离装置，目的是为了解决现有分选法中，由于抗体结合了T细胞，对T细胞造成刺激，可能影响功能实验的准确性；分离纯度也受限于抗体的活性和特异性，对抗体的生产工艺、运输、保存、使用条件有较高要求；分离效果与磁铁的制造工艺和磁场稳定性密切相关，高质量磁铁需要进口且价格较高，且每个磁铁每次仅能分离1个样本，以上多个因素限制了实验的高通量开展的技术问题。

本实用新型提供的外周血T细胞的分离装置，具体技术方案如下：

外周血T细胞的分离装置，包括微流控芯片，所述微流控芯片开设有首尾串联的五个腔室，位于首段的所述腔室连接有进样槽，位于尾端的所述腔室连接有富集槽，

五个所述腔室一一对应包被有捕获干细胞的抗体、捕获粒细胞、单核细胞的抗体、捕获B细胞的抗体、捕获树突状细胞的抗体、捕获NK细胞的抗体。上述五个抗体顺序不固定，可以任一顺序进行排布。

在某些实施方式中，每个所述腔室呈菱形，每个所述腔室均设有多个阵列分布的微柱，相邻两个所述微柱的间隙大于T细胞的直径。菱形设置保证了在液体向前流动过程中与腔室有最大的接触面积，从而能够最大化利用抗体。

进一步，所述微柱的直径为60μm，所述微柱的高度为50μm，相邻两个所述微柱的间隙为60μm。

在某些实施方式中，每个所述腔室的两端分别开设有进样口和出样口，所述进样口通过液槽与前端所述腔室的出样口连通。待处理血液通过液槽流至下一个腔室。

在某些实施方式中，五个所述腔室呈S型分布在所述微流控芯片上。如此，保证微流控芯片具有合适的尺寸，避免微流控芯片过长。

在某些实施方式中，五个所述腔室分别为一号腔室、二号腔室、三号腔室、四号腔室和五号腔室，所述一号腔室、所述二号腔室、所述三号腔室、所述四号腔室和所述五号腔室按照编号顺序首尾串联，所述一号腔室包被有捕获干细胞的抗体，所述二号腔室包被有捕获粒细胞、单核细胞的抗体，所述三号腔室包被有捕获B细胞的抗体，所述四号腔室包被有捕获树突状细胞的抗体，所述五号腔室包被有捕获NK细胞的抗体。上述抗体去除顺序，获得的T细胞的效果最佳。