[实用新型]一种高真空环境光镜电镜关联成像系统

说明书

本实用新型涉及一种高真空环境光镜电镜关联成像系统，包括显微镜主体、高真空腔室、样品传输杆和结构光照明系统。其中，显微镜主体上设置有成像系统，高真空腔室设于显微镜主体上，高真空腔室顶部盖板上设有上通光孔，底部设有下通光孔，上通光孔和下通光孔竖直对齐，相互贯通。成像系统的物镜设于高真空腔室内，并位于上通光孔和下通光孔之间。冷冻样品设于样品传输杆的置物端，置物端穿设于高真空腔室内，以使冷冻样品置于物镜上方。结构光照明系统设于显微镜主体后侧，用于向高真空腔室内发射结构光，结构光穿过下通光孔照射于冷冻样品，实现冷冻结构光照明成像，解决了现有技术中冷冻光学成像分辨率低和光镜电镜成像关联定位精度低的问题。

技术领域

本实用新型涉及冷冻样品显微成像的技术领域，尤其涉及一种高真空环境光镜电镜关联成像系统。

背景技术

冷冻电镜三维重构技术已成为高分辨率结构生物学研究最重要的实验手段。生物样本的快速冷冻制备技术可以将样品在近生理状态下冷冻固定，避免了化学固定方法带来的样品形变、超微结构被破坏等不利影响，从而可以获得更加真实的生物样本结构信息。同时，综合荧光标记、冷冻荧光显微成像和冷冻电镜电子断层扫描成像技术，人们还可以利用荧光定位和电子显微镜对同一细胞内同一位置的分子机器进行特异识别和高分辨率超微结构解析，这项技术被称为冷冻光镜电镜关联显微成像技术(Cryo-Correlative Lightand Electron Microscopy，Cryo-CLEM)。

冷冻光镜电镜关联显微成像技术可以将目标分子的定位与结构信息进行整合，从而解析出目标分子在细胞内原位的高分辨率三维结构，并用于准确统计分析目标分子的原位动态变化规律及其生物学功能、作用机制等。然而，现有的冷冻荧光成像系统受限于冷冻成像环境和光学物镜的数值孔径，严重制约了冷冻光学成像系统所能达到的分辨率，并且使用操作不方便，样品容易污染、损伤，并由此进一步限制了冷冻光镜电镜关联成像技术的关联定位精度、实验成功率和该技术的普及应用。

实用新型内容

(一)要解决的技术问题

鉴于现有技术的上述缺点、不足，本实用新型提供一种高真空环境光镜电镜关联成像系统，解决了现有技术中冷冻成像环境差导致的分辨率低、实验成功率低的问题。

(二)技术方案

为了达到上述目的，本实用新型提供了一种高真空环境光镜电镜关联成像系统，具体技术方案如下：

一种高真空环境光镜电镜关联成像系统，包括：

显微镜主体，设置有成像系统；

高真空腔室，通过固定架设于显微镜主体上，顶部盖板上设有上通光孔，底部设有下通光孔，上通光孔和下通光孔相互贯通；

成像系统的物镜设于高真空腔室内，并位于上通光孔和下通光孔之间；

样品传输杆，包括置物端和抽拉端，并在置物端和抽拉端之间延伸；

冷冻样品设于置物端，置物端穿设于高真空腔室内，以使冷冻样品置于物镜上方；

结构光照明系统，设于显微镜主体后侧，用于向高真空腔室内发射结构光，结构光穿过下通光孔照射于冷冻样品上。

进一步，高真空腔室的侧壁上还设置有位置调节装置；

样品传输杆的置物端能够穿过位置调节装置伸入高真空腔室内，抽拉端与位置调节装置连接；

位置调节装置适于位置调节，能够带动样品传输杆移动，以调节冷冻样品相对于物镜的位置。

进一步，位置调节装置包括波纹管、样品传输管和三维平移台；

三维平移台通过平移台固定架设于高真空腔室上；