[实用新型]稀有细胞染色、洗脱结构及细胞培养皿和细胞培养玻片

说明书

本实用新型公开了一种稀有细胞染色、洗脱结构，包括：微孔阵列，每个微孔的横截面尺寸不大于500μm，每个微孔的底部开设有至少一个纳米孔；上液体交换区和下液体交换区，所述上液体交换区和所述下液体交换区分别设置于所述微孔阵列上方和下方，所述上液体交换区与每个所述微孔顶部连通，所述下液体交换区与所述纳米孔连通，所述纳米孔的尺寸小于单细胞的尺寸。本实用新型还提供了细胞培养皿和细胞培养玻片。本实用新型能够实现染色‑洗脱过程中无细胞损失，且洗脱无需在普通玻片固定或借助离心方式处理，保证了细胞活性。

技术领域

本实用新型涉及细胞染色、培养工具。更具体地说，本实用新型涉及一种稀有细胞染色、洗脱结构及细胞培养皿和细胞培养玻片。

背景技术

目前常规细胞染色方式主要通过在玻片上或在离心管内进行细胞固定、染色、洗脱等，但随着液体活检、细胞治疗、免疫治疗等新的细胞诊断、治疗方式的快速发展，病人原代细胞团的鉴定、捕获、分析等技术越来越重要，随着测序技术的成熟，对其中稀有细胞的分离捕获分析需求也越来越多。细胞染色是细胞鉴定的重要手段之一，利用标准细胞染色-洗脱方法处理稀有细胞及原代活细胞，在操作上会产生数量损失且无法保证细胞活性，单细胞PCR及测序(如转录组分析)则更难实现，除非利用昂贵的设备及耗材，例如液体活检中病人7ml外周血中仅含有CTC细胞一至数百个，临床要求尽量完整收集、有效鉴定CTC并用于下游分析，另外像鉴定及分离怀孕母亲血浆中循环胎儿细胞，像鉴定、分析肿瘤干细胞、免疫治疗细胞、生物技术相关蛋白分泌细胞等都属于此类范畴。另外，随着活细胞免疫荧光染色的逐渐普及，染色细胞的再培养问题逐渐突出。因此，亟需设计一种能够克服上述缺陷的技术方案。

实用新型内容

本实用新型的一个目的是设计一种稀有细胞染色、洗脱结构及细胞培养皿和细胞培养玻片，能够实现染色-洗脱过程中无细胞损失，且洗脱无需在普通玻片固定或借助离心方式处理，保证了细胞活性。

为了实现根据本实用新型的这些目的和其它优点，根据本实用新型的一个方面，提供了稀有细胞染色、洗脱装置，包括：微孔阵列，每个微孔的横截面尺寸不大于500μm，每个微孔的底部开设有至少一个纳米孔；上液体交换区和下液体交换区，所述上液体交换区和所述下液体交换区分别设置于所述微孔阵列上方和下方，所述上液体交换区与每个所述微孔顶部连通，所述下液体交换区与所述纳米孔连通，所述纳米孔的尺寸小于单细胞的尺寸。

进一步地，还包括：微流控泵，其与所述下液体交换区连通，用于将所述下液体交换区内的液体吸出。

进一步地，还包括盖板，所述盖板用于覆盖所述微孔阵列。

进一步地，所述微孔的深度不大于500μm，若用于单个稀有细胞染色、洗脱，深度不小于10μm。

进一步地，所述微孔的容积不大于150nL，不小于5pl。

进一步地，所述微孔的横截面形状为正方形、长方形、圆形、水滴形、椭圆形、六边形、菱形或不规格形状。

根据本实用新型的另一个方面，提供了细胞培养皿，包括培养皿本体，所述培养皿本体表面设置有所述的稀有细胞染色、洗脱结构。

进一步地，所述微孔阵列形成于所述培养皿本体内部底部表面，所述上液体交换区为所述培养皿本体内部位于所述微孔阵列上方的区域，所述下液体交换区为开设在所述培养皿本体中的腔室，所述培养皿本体上开设有与所述腔室连通的开口，所述开口与微流控泵连通。

根据本实用新型的又一个方面，提供了细胞培养玻片，包括细胞培养玻片本体，所述细胞培养玻片本体表面设置有所述的稀有细胞染色、洗脱结构。

进一步地，所述细胞培养玻片本体表面设置有培养槽体，所述微孔阵列形成于所述培养槽体内部底部，所述上液体交换区为所述培养槽体位于所述微孔阵列上方的区域，所述下液体交换区为开设在所述培养槽体中的腔室，所述培养槽体上开设有与所述腔室连通的开口，所述开口与微流控泵连通。