[实用新型]一种外泌体纯化一体机装置

说明书

本实用新型提供了一种外泌体纯化一体机装置，包括通过管路连通的切向流超滤系统、快速蛋白液相色谱系统、纳米颗粒示踪分析系统以及用于驱动的蠕动泵；所述切向流超滤系统包括相连通的第一级切向流超滤装置与第二级切向流超滤装置，所述第一级切向流超滤装置与第二级切向流超滤装置内均设置有超滤膜，且所述第一级切向流超滤系统超滤膜的孔径大于所述第二级切向流超滤系统超滤膜的孔径；所述第二级切向流超滤装置与所述快速蛋白液相色谱系统的进口相连接，所述快速蛋白液相色谱系统的出口与纳米颗粒示踪分析系统相连接。通过本实用新型能够较好地纯化外泌体，具有较高的实用价值。

技术领域

本实用新型涉及生物技术领域，具体而言，涉及一种外泌体纯化方法及外泌体纯化一体机装置。

背景技术

2013年，诺贝尔生理或医学奖授予研究细胞囊泡运输调控机制领域研究的三位科学家，之后外泌体研究逐渐成为科研热点。外泌体(Exosome) 是由活细胞分泌的直径约为30-150nm的小囊泡，具有典型的脂质双分子层结构，广泛存在于细胞培养上清液、血液、唾液、尿液、精液、羊水以及其它生物体液中。其携带有多种蛋白质、脂类、RNA等重要信息，在细胞与细胞间的物质和信息传递中起重要作用，可以调控细胞代谢、细胞凋亡以及免疫调节等作用，可作为医疗美容、再生医学、疾病诊断等行业，被誉为细胞治疗的下一个前沿领域。

目前，外泌体的分离富集提取方法主要靠人工操作，主要技术方法包括离心、沉淀、超滤、免疫亲和及微流控等，并借助流式细胞术和纳米颗粒示踪分析技术对外泌体粒径大小参数等进行定量分析，以便保证外泌体质量。随着科学技术的发展和人们健康观念和追求美的观念的普及，外泌体市场需求变大，传统外泌体分离技术方法规模化提取分离与纯化受限产能不足，造成外泌体供不应求。

由于当前外泌体分离提取多为人工操作，整个分离提取过程繁琐，历经时间较长，现有自动分离提取设备产量低，耗时长，成本高，难以满足市场需求。各外泌体商家迫切需要一套能够快速、大量、优质获取高纯度外泌体制备平台。但是外泌体纯化过程中的超速离心法，过程繁琐，耗时耗力，对操作人员经验依赖性强，收集结果重复性差，回收率低，限制了其在外泌体工业化生产和临床应用；亲和层析、离子交换层析等层析法具备一定的工业纯化生产中，虽然可对目标纯化物进行定量、浓度检测等，但受制于层析柱的对进料样品的PH、缓冲和电导率以及纯化物自身的等电点等参数要求，在工业化进程中具有一定的局限性；免疫磁珠法和微流控法成本较高，经济性差，技术要求较高，适于微量纯化操作，难以大规模制备等问题；此外，对于原料样品中外泌体含量浓度测定和产出的外泌体粒径质量检测也成为商家们的迫切需求，市面上TFF(切向流)、FPLC(快速蛋白液相色谱)、NTA(纳米颗粒跟踪分析)技术独立运行使用限制了整个外泌体行业的发展，难以满足人们对外泌体系列产品日益增长的需求。因此具有外泌体定量检测颗粒示踪分析并可规模化生产的一体机产品成为各大科研院所、高校和企业厂商的迫切需求。同时，整合一套集成TFF、FPLC、 NTA技术并具有兼容操作系统的一体机迫在眉睫。

实用新型内容

本实用新型要解决的技术问题是：提供一种外泌体纯化一体化设备，以解决目前市面上常见外泌体纯化设备生产效率低，操作复杂的问题。

为解决上述问题，本实用新型包括通过管路连通的切向流超滤系统、快速蛋白液相色谱系统、纳米颗粒示踪分析系统以及用于驱动的蠕动泵；所述切向流超滤系统包括相连通的第一级切向流超滤装置与第二级切向流超滤装置，所述第一级切向流超滤装置与第二级切向流超滤装置内均设置有超滤膜，且所述第一级切向流超滤系统超滤膜的孔径大于所述第二级切向流超滤系统超滤膜的孔径；所述第二级切向流超滤装置与所述快速蛋白液相色谱系统的进口相连接，所述快速蛋白液相色谱系统的出口与纳米颗粒示踪分析系统相连接。

作为优选的方案，所述第一级切向流超滤装置上设置有第一级进口、第一级出口，所述第二级切向流超滤装置上设置有第二级进口、第二级出口，且所述第一级出口与所述第二级进口相连通。

作为优选的方案，所述纳米颗粒示踪分析系统还与所述第一级进口相连通。