[发明专利]一种嵌合抗原受体及应用

说明书

提供一种嵌合抗原受体，包括胞外结构域、跨膜结构域和胞内结构域组成的共刺激信号结构域，该共刺激信号结构域包括编码反向dectin‑1的氨基酸全长或片段，可治疗多种实体肿瘤和血液恶性肿瘤。

优先权申请

本申请要求2020年2月13提交的中国发明专利申请【CN2020100907495】、名称为“一种嵌合抗原受体的共刺激信号结构域及其应用”的优先权，该优先权发明专利申请以引用方式全文并入。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种嵌合抗原受体及应用。

背景技术

嵌合抗原受体(Chimeric Antigen Receptor，CAR)T细胞免疫疗法，作为一种非常有前景的肿瘤治疗策略，经历了一系列演化过程。第一代CAR介导的T细胞激活是通过CD3δ或FceRIg上的酪氨酸激活基序完成的。但第一代CAR改造T细胞的抗肿瘤活性在体内受到了限制，因T细胞增殖减少最终导致T细胞的凋亡。第二代CAR在胞内增加了一个新的共刺激信号，例如4-1BB或CD28。第二代CAR与第一代CAR相比，抗原特异性不变，T细胞增殖、细胞因子分泌增加，抗细胞凋亡蛋白分泌增加，细胞死亡延迟。然而，现有的CAR-T细胞免疫疗法目前仅在治疗血液恶性肿瘤方面取得了显著进展，而在治疗实体瘤领域的成功有限。

CAR-T细胞免疫疗法在治疗血液恶性肿瘤方面的进展包括非霍奇金淋巴瘤(NHL)，B细胞急性淋巴细胞白血病(ALL)，多发性骨髓瘤(MM)和慢性淋巴细胞白血病(CLL)。到目前为止，CD19特异性或BCMA特异性CAR-T的临床试验的客观缓解率(ORR)为48％～95％。2017年，美国食品药品监督管理局(US FDA)批准了两种针对B细胞淋巴瘤的CAR-T细胞产品，AxicabtageneCiloleucel(KTE-C19,Kite Pharma)和Tisagenlecleuce(CTL019,Novartis)。在Axicabtageneciloleucel的1/2期临床试验中，对108名难治性大B细胞淋巴瘤患者进行了为期2年的随访。结果显示，83％的患者达到客观缓解(OR)，58％的患者达到完全缓解(CR)，平均随访期为15.4个月(IQR 13.7-17.3)。这表明CAR-T细胞治疗可以维持长期缓解。但在实体瘤治疗中，CAR-T细胞疗法仍然面临许多挑战。例如缺乏适当的肿瘤特异性抗原，肿瘤微环境抑制以及CAR-T细胞定位和持久性不足。另外，持续的抗原暴露会导致CAR-T细胞衰竭，进而损害CAR-T细胞对肿瘤的有效性。因此，需要设计新的CAR来用于实体瘤的治疗。

Dectin-1，即CLEC-7A，是C型凝集素受体(CLRs)的一个新的亚组。Dectin-1包括细胞外结构域，跨膜结构域和细胞内结构域。Dectin-1的细胞外部分已被用作靶向真菌的CAR-T细胞的scFv。Dectin-1不仅主要在包括中性粒细胞，单核细胞，树突状细胞和巨噬细胞在内的髓样细胞上表达，而且在人的T细胞和B细胞的某些亚群上也表达。Dectin-1通过激活NK细胞在肿瘤生长和转移中起重要作用。Dectin-1还可以调节各种细胞反应，例如DC成熟，抗原呈递以及细胞因子和趋化因子的产生。此外，理论上，Dectin-1可以直接诱导先天免疫记忆，并影响CD8、CD4、T细胞和B细胞的发育。

综上，本发明实验团队设计将Dectin-1并入二代CAR结构中作为共刺激信号域，评估其改造的新型二代CAR-T细胞的功能和抗肿瘤活性。以解决上述问题中的至少一个。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供一种新型的二代CAR结构。

一种嵌合抗原受体，包括胞外结构域、跨膜结构域和胞内结构域，所述嵌合抗原受体的所述跨膜结构域和所述胞内结构域组成共刺激信号结构域，所述共刺激信号结构域包括编码反向dectin-1的氨基酸全长或片段。

进一步，所述胞外结构域包括靶向CD19或靶向HER2的单链抗体。