[发明专利]脂质纳米颗粒

说明书

本发明涉及脂质纳米颗粒(LNP)领域；更具体地，包含可电离的脂质、磷脂、甾醇、PEG脂质和一种或多种核酸。本发明的LNP的特征在于包含低于约1摩尔％的C18‑PEG2000脂质。本发明提供了LNP用于核酸分子，特别是mRNA的免疫原性递送的用途；从而使它们非常适合用于疫苗，例如用于治疗癌症或感染性疾病。最后，提供了制备这样的LNP的方法。

发明领域

本发明涉及脂质纳米颗粒(LNP)领域；更具体地包含可电离的脂质、磷脂、甾醇、PEG脂质和一种或多种核酸。本发明的LNP的特征在于，其包含小于约1摩尔％的PEG脂质(如二C18-PEG2000脂质)。本发明提供了LNP用于核酸分子，特别是mRNA的免疫原性递送的用途；从而使它们非常适合用于疫苗，例如用于治疗癌症或传染性疾病。最后，提供了用于制备这样的LNP的方法。

发明背景

生物活性物质的靶向递送领域的主要挑战之一通常是它们的不稳定性和低细胞穿透潜力。对于核酸分子，特别是(m)RNA分子的递送，情况尤其如此。因此，适当的包装对于充分的保护和递送是至关重要的。因此，持续需要用于包装生物活性物质如核酸的方法和组合物。

在这方面，基于脂质的纳米颗粒组合物例如脂质复合物(lipoplex)和脂质体已经用作生物活性物质的包装载体，以允许运输到细胞和/或细胞内区室中。这些基于脂质的纳米颗粒组合物通常包含不同脂质的混合物，所述脂质例如阳离子脂质、可电离的脂质、磷脂、结构脂质(例如甾醇或胆固醇)、PEG(聚乙二醇)脂质、…(如Reichmuth等人，2016中综述的)。

已经开发了由4种脂质(阳离子或可电离的脂质、磷脂、甾醇和聚乙二醇化脂质)的混合物组成的基于脂质的纳米颗粒，用于在全身施用后将siRNA和mRNA非免疫原性递送到肝脏。虽然许多这样的脂质组合物是本领域已知的，但是用于体内mRNA递送的那些通常包含至少1.5摩尔％水平的PEG脂质，并且经常含有基于二C14的PEG脂质(DMG-PEG脂质)。

然而，我们目前惊奇地发现，以低量(即小于约1摩尔％)存在于LNP中的PEG脂质产生了非常适于在全身注射LNP后免疫原性递送mRNA的纳米颗粒。此外，对于更长链的PEG脂质如二C18-PEG脂质，这些作用甚至更显著。

发明内容

在第一方面，本发明提供了包含一种或多种脂质纳米颗粒的mRNA疫苗，所述脂质纳米颗粒包含：

-可电离的脂质；

-磷脂；

-甾醇；

-PEG脂质；以及

-一种或多种mRNA分子；

其特征在于，所述LNP包含小于约1摩尔％的所述PEG脂质；优选约0.5-0.9摩尔％和介于0.5-0.9摩尔％之间的所述PEG脂质。

在另一方面，本发明提供了用于mRNA疫苗接种的脂质纳米颗粒(LNP)，所述LNP包含：

-可电离的脂质；

-磷脂；

-甾醇；

-PEG脂质；以及

-一种或多种mRNA分子；

其特征在于，所述LNP包含小于约1摩尔％的所述PEG脂质；优选约0.5-0.9摩尔％和介于0.5-0.9摩尔％之间的所述PEG脂质。

在另一方面，本发明提供了脂质纳米颗粒(LNP)，其包含：

-可电离的脂质；

-磷脂；

-甾醇；