[发明专利]无病毒细胞培养物在审
申请号: | 202180013293.5 | 申请日: | 2021-02-09 |
公开(公告)号: | CN115052974A | 公开(公告)日: | 2022-09-13 |
发明(设计)人: | M·洛切里;P·科洛西;B·卡特;T·齐内克 | 申请(专利权)人: | 生物马林药物股份有限公司 |
主分类号: | C12N7/00 | 分类号: | C12N7/00 |
代理公司: | 北京北翔知识产权代理有限公司 11285 | 代理人: | 孙占华;张广育 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 病毒 细胞培养 | ||
1.一种从细胞中除去外来病毒的方法,所述方法包含:
(a)在高于或低于(i)外来病毒复制的第一最佳温度范围或(ii)细胞复制的第二最佳温度范围的次优温度,在细胞培养物中培养细胞至少2代,以及
(b)检测所述细胞在所述温度生长以后所述细胞培养物中所述外来病毒的减少。
2.根据权利要求1所述的方法,所述方法进一步包含从所述细胞培养物分离细胞和单独培养所述细胞的步骤。
3.根据权利要求1所述的方法,其中所述次优温度比所述第一最佳温度范围或所述第二最佳温度范围高至少3℃。
4.根据权利要求1所述的方法,其中所述次优温度比所述第一最佳温度范围或所述第二最佳温度范围低至少3℃。
5.根据权利要求1所述的方法,其中所述次优温度比所述第一最佳温度范围或所述第二最佳温度范围高或低至少6℃。
6.根据权利要求1所述的方法,其中所述次优温度比所述第一最佳温度范围或所述第二最佳温度范围低至少6℃。
7.根据权利要求1所述的方法,所述方法进一步包含,在培养步骤之前,通过在一时间段内将所述细胞培养物的温度逐渐改变至所述次优温度,使所述细胞适应于在所述次优温度生长。
8.根据权利要求7所述的方法,其中在每次传代以后将所述细胞培养物的温度改变至少0.1℃。
9.根据权利要求7所述的方法,其中在每次传代以后将所述细胞培养物的温度改变至少1℃。
10.根据权利要求7所述的方法,其中所述时间段是将细胞传代至少4次的时间。
11.一种从细胞中除去外来病毒的方法,所述方法包含:
(a)在有效地从细胞培养物中除去或治愈外来病毒的量的一种或多种抗病毒剂存在下,在细胞培养物中培养细胞至少五代,以及
(b)检测在所述一种或多种抗病毒剂存在下培养以后所述培养物中外来病毒的减少。
12.根据权利要求11所述的方法,所述方法进一步包含从所述细胞培养物分离细胞和单独培养所述细胞的步骤。
13.根据权利要求1-12中任一项所述的方法,其中所述细胞是昆虫细胞或哺乳动物细胞。
14.根据权利要求1-12中任一项所述的方法,其中所述细胞来自草地贪夜蛾细胞、粉纹夜蛾细胞、目夜蛾细胞或白纹伊蚊细胞。
15.根据权利要求13或14所述的方法,其中所述昆虫细胞是Sf9细胞。
16.根据权利要求1-15中任一项所述的方法,其中所述外来病毒是单分子负链RNA病毒目、弹状病毒、sf-弹状病毒、质型弹状病毒、暂时热病毒、野田村病毒、Norvihabdovirus、核型弹状病毒、Perhabdovirus、西格玛病毒、Sinistar-样病毒、Sprivivirus、Tibrovirus、Tupavirus、水泡性病毒、Taastrup病毒、Nakha病毒、金迪普拉病毒、生菜黄色斑点病毒、常春藤镶脉病毒分离物或Durham病毒。
17.根据权利要求1-15中任一项所述的方法,其中所述外来病毒是单分子负链RNA病毒目病毒。
18.根据权利要求1-15中任一项所述的方法,其中所述外来病毒是弹状病毒。
19.根据权利要求1-15中任一项所述的方法,其中所述外来病毒是Sf-弹状病毒。
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