[发明专利]细胞培养物、细胞培养物的评价方法、细胞培养物的制作方法以及软骨样组织形成特性评价用的标志物在审
申请号: | 202180020937.3 | 申请日: | 2021-03-12 |
公开(公告)号: | CN115698260A | 公开(公告)日: | 2023-02-03 |
发明(设计)人: | 佐藤正人;高桥匠;川口祐加;佐藤千香子;角田智志;远山千春;宋丹丹;宫沢道秀 | 申请(专利权)人: | 学校法人东海大学;创革医疗科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;A61L27/36;A61L27/38;C07K14/705;C12Q1/04;G01N15/14;G01N33/53 |
代理公司: | 北京律和信知识产权代理事务所(普通合伙) 11446 | 代理人: | 谢清萍;刘兴 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞培养 评价 方法 制作方法 以及 软骨 组织 形成 特性 标志 | ||
1.一种具有软骨样组织形成特性的细胞培养物,其特征在于,所述细胞培养物中所含的细胞群为:
选自由CD166、CD165、CD99、GD2、STRO-1、CD108、CD164、CD6、CD106和CD107b所组成的群组中至少一种的细胞表面标志物的表达强度为各种细胞表面标志物各自的阈值以下;和/或
选自由CD26、CD73、CD105、CD44、CD120a、CD201、EGFR、CD146、CD140a和CD90所组成的群组中至少一种的细胞表面标志物的表达强度为各个细胞表面标志物各自的阈值以上。
2.根据权利要求1所述的具有软骨样组织形成特性的细胞培养物,其特征在于,所述细胞表面标志物中,至少CD99和/或GD2的表达强度为这些细胞表面标志物各自的阈值以下;和/或
在所述细胞表面标志物中,至少CD26、CD73和CD44中的任意一种、任意两种或任意三种的表达强度为这些细胞表面标志物各自的阈值以上。
3.根据权利要求1或2所述的具有软骨样组织形成特性的细胞培养物,其特征在于,所述表达强度是通过流式细胞仪分析所述细胞群而测定的标准化平均荧光强度。
4.根据权利要求1至3中任一权利要求所述的具有软骨样组织形成特性的细胞培养物,其特征在于,通过流式细胞仪分析所述细胞群时测定的标准化平均荧光强度满足以下条件1至条件10中的至少一个,和/或满足下列条件11至条件20中的至少一个:
条件1:当所述细胞群被结合有PE的抗CD166抗体标记时,来源于所述PE的标准化平均荧光强度为240以下;
条件2:当所述细胞群被结合有BB700的抗CD165抗体标记时,来源于所述BB700的标准化平均荧光强度为132以下;
条件3:当所述细胞群被结合有FITC的抗CD99抗体标记时,来源于所述FITC的标准化平均荧光强度为1.9以下;
条件4:当所述细胞群被结合有BB700的抗GD2抗体标记时,来源于所述BB700的标准化平均荧光强度为3.6以下;
条件5:当所述细胞群被结合有FITC的抗STRO-1抗体标记时,来源于所述FITC的标准化平均荧光强度为1.4以下;
条件6:当所述细胞群被结合有PE的抗CD108抗体标记时,来源于所述PE的标准化平均荧光强度为1.9以下;
条件7:当所述细胞群被结合有PE的抗CD164抗体标记时,来源于所述PE的标准化平均荧光强度为3.0以下;
条件8:当所述细胞群被结合有FITC的抗CD6抗体标记时,来源于所述FITC的标准化平均荧光强度为1.4以下;
条件9:当所述细胞群被结合有FITC的抗CD106抗体标记时,来源于所述FITC的标准化平均荧光强度为2.4以下;
条件10:当所述细胞群被结合有FITC的抗CD107b抗体标记时,来源于所述FITC的标准化平均荧光强度为2.0以下;
条件11:当所述细胞群被结合有FITC的抗CD26抗体标记时,来源于所述FITC的标准化平均荧光强度为2.3以上;
条件12:当所述细胞群被结合有FITC的抗CD73抗体标记时,来源于所述FITC的标准化平均荧光强度为47以上;
条件13:当所述细胞群被结合有PE的抗CD105抗体标记时,来源于所述PE的标准化平均荧光强度为21以上;
条件14:当所述细胞群被结合有FITC的抗CD44抗体标记时,来源于所述FITC的标准化平均荧光强度为128以上;
条件15:当所述细胞群被结合有APC的抗CD120a抗体标记时,来源于所述APC的标准化平均荧光强度为24以上;
条件16:当所述细胞群被结合有PE的抗CD201抗体标记时,来源于所述PE的标准化平均荧光强度为18以上;
条件17:当所述细胞群被结合有PE的抗EGFR抗体标记时,来源于所述PE的标准化平均荧光强度为3.2以上;
条件18:当所述细胞群被结合有FITC的抗CD146抗体标记时,来源于所述FITC的标准化平均荧光强度为1.6以上;
条件19:当所述细胞群被结合有PE的抗CD140a抗体标记时,来源于所述PE的标准化平均荧光强度为5.6以上;
条件20:当所述细胞群被结合有APC的抗CD90抗体标记时,来源于所述APC的标准化平均荧光强度为800以上。
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