[发明专利]活性DNA转座子系统及其使用方法在审

申请号：	202180025387.4	申请日：	2021-03-30
公开（公告）号：	CN115698301A	公开（公告）日：	2023-02-03
发明（设计）人：	王皓毅;张勇;谭生军;张童童	申请（专利权）人：	中国科学院动物研究所
主分类号：	C12N15/75	分类号：	C12N15/75;C12N15/65
代理公司：	北京彩和律师事务所 11688	代理人：	张红春
地址：	100101 北***	国省代码：	北京;11
权利要求书：	查看更多	说明书：	查看更多
摘要：
搜索关键词：	活性 dna 座子系统及其使用方法
钻瓜网技术展会专利词库专利权人专利榜在售专利公布日期热门专利

【权利要求书】：

1.一种工程化转座元件，其从5'到3'包含：

5'末端重复序列(5'TR)、异源核酸和3'末端重复序列(3'TR)，

其中所述5'TR包含选自SEQ ID NO:1-26和79-90的核酸序列、其变体或其片段，

其中所述3'TR包含选自SEQ ID NO:27-52和91-102的核酸序列、其变体或其片段，并且

其中所述转座元件表现出允许异源核酸插入细胞的DNA中的转座活性。

2.根据权利要求1所述的转座元件，其中所述5'TR包含与选自SEQ ID NO:1-26和79-90的核酸序列具有至少约90％序列同一性的核酸序列，和/或其中所述3'TR包含与选自SEQID NO:27-52和91-102的核酸序列具有至少约90％序列同一性的核酸序列。

3.根据权利要求2所述的转座元件，其中所述5'TR包含选自SEQ ID NO:1-26和79-90的核酸序列，和/或其中所述3'TR包含选自SEQ ID NO:27-52和91-102的核酸序列。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的转座元件，其还包含侧接所述5'TR的5'的5'靶位点重复序列(TSD)或侧接所述3'TR的3'的3'TSD，其中所述5'TSD包含选自SEQ ID NO:191-206的核酸序列、其变体或其片段，并且其中所述3'TSD包含选自SEQ ID NO:191-206的核酸序列、其变体或其片段。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的转座元件，其中所述5'TR包含与选自SEQ ID NO:3、8、11、12、13、16、22、23、79和82的核酸序列具有至少约90％序列同一性的核酸序列，并且所述3'TR包含与选自SEQ ID NO:29、34、37、38、39、42、48、49、91和94的核酸序列具有至少约90％序列同一性的核酸序列。

6.根据权利要求5所述的转座元件，其中：

(a)所述5'TR包含SEQ ID NO:3的核酸序列，而所述3'TR包含SEQ ID NO:29的核酸序列；

(b)所述5'TR包含SEQ ID NO:8的核酸序列，而所述3'TR包含SEQ ID NO:34的核酸序列；

(c)所述5'TR包含SEQ ID NO:11的核酸序列，而所述3'TR包含SEQ ID NO:37的核酸序列；

(d)所述5'TR包含SEQ ID NO:12的核酸序列，而所述3'TR包含SEQ ID NO:38的核酸序列；或者

(e)所述5'TR包含SEQ ID NO:16的核酸序列，而所述3'TR包含SEQ ID NO:42的核酸序列。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的转座元件，其中所述异源核酸包含编码序列。

8.根据权利要求7所述的转座元件，其中所述异源核酸进一步包含与所述编码序列可操作地连接的启动子。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的转座元件，其中所述转座元件的转座活性高于piggyBac(PB)转座子、SleepingBeauty(SB)转座子和/或TcBuster(TB)转座子的转座活性。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的转座元件，其中所述细胞为动物细胞、植物细胞、藻类细胞、真菌细胞、酵母细胞或细菌细胞。

11.根据权利要求1-10中任一项所述的转座元件，其中所述细胞是哺乳动物细胞。

12.根据权利要求11所述的转座元件，其中所述哺乳动物细胞选自免疫细胞、肝细胞、肿瘤细胞、干细胞、受精卵、肌肉细胞和皮肤细胞。