[发明专利]制备活化免疫细胞的方法在审
申请号: | 202180029934.6 | 申请日: | 2021-03-03 |
公开(公告)号: | CN115443332A | 公开(公告)日: | 2022-12-06 |
发明(设计)人: | P·R·康塔格;C·沃克;P·巴德瓦杰 | 申请(专利权)人: | 生物日食治疗公司 |
主分类号: | C12N5/0783 | 分类号: | C12N5/0783;A61K35/13;A61K35/17 |
代理公司: | 北京市金杜律师事务所 11256 | 代理人: | 陈文平 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 制备 活化 免疫 细胞 方法 | ||
1.一种制造稳定的免疫细胞群体的方法,所述方法包括
a)在选择及提高自然杀伤T(NKT)细胞、自然杀伤(NK)细胞和/或T细胞的条件下在约37℃培养免疫细胞,
b)从培养物移出所述细胞且将所述细胞保持在约2℃至约室温长达约120小时,从而产生所述稳定的免疫细胞群体。
2.根据权利要求1所述的方法,其中所述稳定的免疫细胞群体包括细胞因子-诱导的杀伤(CIK)细胞。
3.根据权利要求2所述的方法,其中所述CIK细胞为CD3+/CD56+细胞。
4.根据权利要求2或3所述的方法,其中保持或提高所述群体中的CIK细胞的百分比。
5.根据权利要求1所述的方法,其中所述稳定的免疫细胞群体包括CD3+/CD56+细胞。
6.根据权利要求5所述的方法,其中保持或提高所述群体中的CD3+/CD56+细胞的百分比。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法,其中所述稳定的免疫细胞群体包括NKG2D+细胞。
8.根据权利要求7所述的方法,其中保持或提高所述群体中的NKG2D+细胞的百分比。
9.根据权利要求7或8所述的方法,其中保持或提高CD3+/CD56+/NKG2D+细胞的百分比。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法,其中所述稳定的免疫细胞群体的存活率大于约70%。
11.根据权利要求10所述的方法,其中通过台盼蓝拒染法或通过流式细胞术测量细胞的存活率。
12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法,其中所述免疫细胞源于外周血单核细胞(PBMC)。
13.根据权利要求1至12中任一项所述的方法,其中步骤a)的免疫细胞在约1升至约10升的培养基中培养。
14.根据权利要求1至13中任一项所述的方法,其中步骤a)的免疫细胞在约1升或约5升的培养基中培养。
15.根据权利要求1至14中任一项所述的方法,其中培养步骤a)的免疫细胞约28天、约32天、约36天或约40天。
16.根据权利要求1至15中任一项所述的方法,其中将步骤b)的细胞保持在室温。
17.根据权利要求1至16中任一项所述的方法,其中室温为约22℃。
18.根据权利要求1至15中任一项所述的方法,其中将步骤b)的细胞保持在约2℃至约8℃或约4℃。
19.根据权利要求1至18中任一项所述的方法,其中将步骤b)的细胞保持在袋中。
20.根据权利要求19所述的方法,其中所述袋为塑料袋。
21.根据权利要求19或20所述的方法,其中所述袋为不透气的。
22.根据权利要求1至21中任一项所述的方法,其中将步骤b)的细胞保持在1%CO2中。
23.根据权利要求1至22中任一项所述的方法,其中将步骤b)的细胞保持在盐溶液中。
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