[发明专利]通过质谱法进行固相亲和选择

说明书

在用于通过质谱法进行亲和选择的系统中，其中溶液中的多种药物候选物基于亲和力被分离，提供了方法，所述方法包括：将对选择的蛋白质具有结合亲和力的固相装置引入到溶液中，将多种药物候选物中的至少一种结合至固相装置作为选择的药物候选物，洗涤固相装置和选择的药物候选物以分离未结合的物质，对流经开放端口取样接口的取样区域的捕获流体中的选择的药物候选物取样，并将取样的选择的药物候选物和捕获流体引导至电离源。

相关美国申请

本申请要求2020年5月22日提交的美国临时申请No.63/029,028的优先权的权益，其全部内容通过引用并入本文。

领域

本发明涉及处理流体，并且更特别地涉及基于选择的亲和力来鉴定和分离化合物的方法和系统。

背景

通过质谱法进行亲和选择(ASMS)涉及候选分子与固定或可溶的受体的结合，并且已经以时间和成本有效的方式用于筛选大型化合物库。传统的ASMS工作流程基于溶液相孵育，其中将溶液中的靶蛋白添加到药物分子的混合物中。然后通过例如超滤、旋转柱和尺寸排阻色谱的机制将未结合的药物分子与药物-蛋白质复合物分离。在基于分子量的分离后，将蛋白质-药物复合物和未结合的蛋白质注入到反相LC/MS中用于分析。用对靶蛋白的结合亲和力鉴定由MS检测到的药物分子(在LC中释放)。然而，根据常规方法的分析速度是有限的，因为使用LC从蛋白质-药物复合物分离(即洗脱)游离药物耗费时间。

在固相ASMS中，可以将固相装置的表面上的酶插入到溶液中的药物混合物中，以捕获对固相装置的固相表面具有亲和力的药物分子。这种固相装置的实例包括磁性粒子和固相微萃取(SPME)纤维，然而与其他固相装置如SPME纤维相比，磁性粒子具有更大的表面积，其改善捕获灵敏度。在一种这样的方法MagMASS(J.Nat.Prod.2016，79，2898-2902)中，磁性粒子被用来“钓出”具有蛋白质结合亲和力的药物分子，而在溶液中留下未结合的药物。如果有必要，可以在将药物分子洗脱至液相并喷射至LC-MS/MS之前洗涤磁性粒子。

还已知使用开放端口取样接口(OPI)，用于具有结合的药物分子的固相基质例如SPME纤维(参见US10103015B2，其内容通过引用并入本文)的直接取，并且其中固相装置为磁性粒子以使用磁体(例如电磁体)用于磁性粒子在样品槽之间和/或从样品槽至OPI的传输(参见PCT/IB2018/089146，其内容通过引用并入本文)。当使用OPI来传输磁性粒子至MS端口时必须小心以避免磁性粒子被摄入到MS中。