[发明专利]外泌体衍生的PIWI-相互作用RNA及使用其的方法

说明书

本文提供的是衍生自治疗性外泌体的PIWI‑相互作用RNA(piRNA)，以及使用其治疗需要组织修复和/或再生的病症的方法。通过外泌体衍生的piRNA和/或携带piRNA的外泌体治疗的病症在一些实施方案中包括缺血性损伤和/或组织纤维化。还提供了包含外泌体衍生的piRNA和药学上可接受的赋形剂的治疗组合物。

相关申请的交叉引用

本申请要求2020年5月19日提交的美国临时申请No.63/027191的优先权，该申请的全部内容通过引用并入本文。

关于联邦资助研发的声明

本发明是在国家卫生研究院授予Eduardo Marbán博士的授权号为R01 HL124074的政府支持下完成的。政府对本发明拥有一定权利。

序列表的引用

本申请与电子格式的序列表一起提交。序列表以2021年5月16日创建的命名为SEQLIST_CSMC014WO.txt的文件提供，该文件大小为3.85KB。序列表的电子格式的信息通过引用全部并入本文。

技术领域

本公开内容一般而言涉及衍生自外泌体的PIWI-相互作用RNA(piRNA)及其治疗需要组织修复和/或再生的病症的用途。

背景技术

piRNA是一组与PIWI蛋白相关的小型非编码RNA，并且已知其在生殖系细胞中的基因沉默反转录转座子和其他遗传元件中发挥作用。细胞质PIWI蛋白是引导转座子目标的内切核苷酸的小型RNA引导核酸酶(剪切器(slicer))，而核PIWI蛋白在目标基因座上组装沉默复合物以介导转录沉默。

心球衍生细胞(Cardiosphere-derived cells，CDC)是一种心脏源性祖细胞群，其在临床前和临床环境中具有经证明的治疗效果。CDC通过分泌细胞外囊泡(EV)(即充满生物活性分子的脂质双层纳米颗粒)而发挥作用。保留了治疗潜力的永生化CDC(imCDC)可以被生成，并通过其分泌的EV提供增强的CDC功能。

发明内容

本文提供一种治疗缺血性心肌损伤的无外泌体和任选地无细胞方法，包括：识别具有缺血性心肌损伤或需要治疗缺血性心肌损伤的受试者；向该种受试者施用有效(或治疗有效)量的外泌体衍生的PIWI-相互作用RNA(piRNA)。在几个实施方案中，有效(或治疗有效)量包括约80ng至约5mg的piRNA，以由此治疗缺血性心肌损伤。任选地，外泌体衍生的piRNA包括CDC(心球衍生细胞)衍生的外泌体piRNA。任选地，缺血性心肌损伤包括缺血/再灌注损伤。在一些实施方案中，缺血性心肌损伤包括心肌纤维化。在一些实施方案中，受试者患有心肌梗塞。在一些实施方案中，在缺血性心肌损伤后约10分钟至约2小时施用有效(或治疗有效)量的外泌体衍生的piRNA。

还提供一种治疗缺血性心肌损伤的无外泌体和任选地无细胞方法，包括：识别需要治疗缺血性心肌损伤的受试者；以及向该种受试者施用有效(或治疗有效)量的包含hsa_piR_016659的核苷酸序列的piRNA，以由此治疗缺血性心肌损伤。此外，本文提供一种治疗肌肉损伤(例如心肌损伤)的无外泌体方法，包括向受试者施用有效(或治疗有效)量的piRNA(诸如hsa_piR_016659)，以由此治疗肌肉损伤。任选地，该piRNA由hsa_piR_016659的核苷酸序列组成。在一些实施方案中，缺血性心肌损伤包括缺血/再灌注损伤。在一些实施方案中，缺血性心肌损伤包括心肌纤维化。在一些实施方案中，受试者患有心肌梗塞。在一些实施方案中，在缺血性心肌损伤后约10分钟至约2小时施用治疗有效量的piRNA。在一些实施方案中，治疗有效量包括约80ng至约5mg的piRNA。在一些实施方案中，该piRNA包括一种或多种化学修饰的核苷酸。