[发明专利]细胞培养容器、细胞培养容器的制造方法、细胞的制造方法、细胞培养装置、及细胞培养用夹具

说明书

本文提供用于以高密度培养细胞的气体透过性和强度优异的细胞培养容器。细胞培养容器，其为具有至少1个端口、通过对置的平面状器材11形成的袋状闭锁体系的细胞培养容器1，平面状器材11的至少一方由气体透过性膜构成，在至少1个气体透过性膜的外表面具备与该气体透过性膜内表面的形状不同形状的突起部111，且在该气体透过性膜的内表面侧具备用于培养细胞的培养空间S，在使该气体透过性膜与平面接触时，通过突起部111在该气体透过性膜与平面之间形成能够通气的空间。

技术领域

本发明涉及细胞培养技术，特别是涉及用于以高密度培养细胞的细胞培养容器及细胞培养用夹具。

背景技术

近年来，在医药品的生产、基因的治疗、再生医疗、免疫疗法等领域中，要求着在人工环境下效率良好地大量培养细胞、组织等。

这样的情况下，提出了使用袋状细胞培养容器在闭锁体系中自动大量培养细胞的方案。

在使用袋状细胞培养容器培养细胞的情况下，有时将容器载置于培养箱内而使用，或者为了抑制培养液在容器内的移动而使培养环境稳定，将容器夹在按压夹具中的状态下使用。

但是，由于袋状细胞培养容器通常是将2张膜贴合而形成，其外表面平坦，因此，如果载置于培养箱内，则存在经由容器底面的气体透过不足的问题。

即，在培养箱的载置台上通常使用被称为穿孔金属的开孔板，但由于其开口率多为50％以下，因此在开孔部分以外，细胞培养容器的表面与载置台密接，妨碍向容器内的气体透过，在高密度培养时细胞的氧消耗增多的情况下，存在容器内的细胞周边的氧浓度降低的问题。

此外，在夹在按压夹具中的状态下使用时，由于容器表面密接在按压夹具的架台、按压部件，因此这情况下容器的气体透过性能也受到阻碍，存在细胞周边的氧浓度降低、细胞增殖效率降低的问题。

此外，在使用袋状细胞培养容器大量培养细胞的情况下，容器的强度和气体透过性的大小变得重要。

例如，在使用聚乙烯、乙烯醋酸乙烯酯等气体透过性膜制造细胞培养容器情况下，为了确保容器的强度，通常100μm以上的厚度是必要的。

但是，在这情况下，培养细胞的密度达到50万个/cm²以上的高密度时，容器的气体透过性能变得不充分，细胞周边的氧浓度降低，存在增殖效率降低的问题。

另一方面，在使用例如50μm以下厚度的气体透过性膜制造细胞培养容器的情况下，即使培养细胞处于高密度的状态，气体透过性能也充分，但是容器的强度变得不充分，产生破袋的危险，存在处理困难的问题。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特许第4806761号公报

专利文献2：日本特开2016-77164号公报

发明内容

发明要解决的课题

在此，专利文献1中记载了通过在培养用托盘的压板的与袋状容器接触的位置设置多个通气孔，提高袋状容器的气体透过性能。

但是，由于在袋状容器内通常细胞堆积在下表面侧，因此仅在压板有通气孔，气体透过性能的提高效果小，该培养用托盘不能充分消除容器内的细胞周边的氧浓度降低的问题。

因此，本发明人等进行了深入研究，在构成容器的气体透过性膜的外表面具备突起部，使气体透过性膜与平面接触时，通过突起部在气体透过性膜与平面之间形成能够通气的空间，由此即使在高密度培养时，也成功地使细胞培养容器的气体透过性能充分。

此外，根据这样的细胞培养容器，即使在将气体透过性膜的厚度设为小于100μm的情况下，也能够确保处理时的强度。