[发明专利]包含两种不同RNA复制子颗粒的甲型猪流感病毒疫苗

说明书

本发明涉及包含第一和第二RNA复制子颗粒的免疫原性组合物。第一RNA复制子颗粒包含核酸构建体，所述核酸构建体包含编码甲型猪流感病毒(IAV‑S)的第一和第二血凝素(HA)抗原的第一和第二核酸序列。第一HA抗原是A/swine/Gent/1/1984‑样H3N2(Gent/84)谱系的HA抗原，且第二HA抗原是A(H1N1)pdm09(pdm09)谱系的HA抗原。第二RNA复制子颗粒包含核酸构建体，所述核酸构建体包含编码IAV‑S的第三和第四HA抗原的第三和第四核酸序列。第三HA抗原是A/swine/Scotland/410440/1994‑样H1_huN2(Scot/94)谱系的HA抗原，且第四HA抗原是欧亚类禽H1_avN1(EA)谱系的HA抗原。在其他实施方案中，本发明涉及可用于抵抗甲型流感病毒感染且包含免疫原性组合物的疫苗。进一步提供了制备疫苗的方法和疫苗的用途。

本发明涉及包含第一和第二RNA复制子颗粒的免疫原性组合物。第一RNA复制子颗粒包含核酸构建体，所述核酸构建体包含编码甲型猪流感病毒(IAV-S)的第一和第二血凝素(HA)抗原的第一和第二核酸序列。第一HA抗原是A/swine/Gent/1/1984-样H3N2(Gent/84)谱系的HA抗原，且第二HA抗原是A(H1N1)pdm09(pdm09)谱系的HA抗原。第二RNA复制子颗粒包含核酸构建体，所述核酸构建体包含编码IAV-S的第三和第四HA抗原的第三和第四核酸序列。第三HA抗原是A/swine/Scotland/410440/1994-样H1_huN2(Scot/94)谱系的HA抗原，且第四HA抗原是欧亚类禽(Eurasian avian-like)H1_avNl(EA)谱系的HA抗原。在其他实施方案中，本发明涉及可用于抵抗甲型流感病毒感染且包含免疫原性组合物的疫苗。进一步提供了制备疫苗的方法和疫苗的用途。

背景技术

甲型流感病毒(IAV)在世界范围内对人类和动物的健康造成重大负担。IAV基于病毒表面糖蛋白、血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)，被分为不同亚型。IAV感染家禽、猪、马、猫、狗、海洋哺乳动物(例如，鲸)、蝙蝠和人。野生水禽和岸鸟(鸭、鹅、天鹅和鸥)是天然储存宿主(reservoir)，它们可以被16种不同的HA和9种不同的NA亚型感染[Webster等，MicrobiolRev 56：152-179(1992)]。

甲型猪流感病毒(IAV-S)是一种世界范围内的严重的家猪呼吸道病原体，其已被证明造成巨大经济损失，特别是对畜牧业[Holtkamp等，The American Association ofSwine Veterinarians Annual Meeting(2007)]。它的特征在于呼吸疾病的突然发作，并且通常伴有厌食、嗜睡和发烧。除了生产动物中的与IAV-S相关的临床并发症之外，已发表的报告还表明猪会将流感病毒传播给人类[Myers KP,Olsen CW,Gray GC.Clin Infect Dis2007；44(8):1084–8,Krueger和Gray,Curr Top Microbiol Immunol 370:201-225(2013)]，这代表重大的公共卫生威胁，为控制猪群中的IAV提供了更大的动机。

针对这一问题，许多养猪户现在应用市售疫苗对其猪进行疫苗接种以抵抗IAV-S。但是，用常规疫苗控制IAV-S是困难的，因为许多不同的IAV-S毒株在田间共同传播并持续进化[Gao等，J Gen Virol 98(8):2001-2010(2017)]。IAV-S的多样性和可变性是由病毒的遗传结构引起的。与其他甲型流感病毒一样，IAV-S具有在8个RNA片段上编码的基因和引入频繁突变的基因组复制机制。这些遗传特征使得IAV-S能够进行快速适应，包括逃避由暴露先前的毒株诱导的现有中和抗体。因此，美国市场上可商购的灭活病毒IAV-S疫苗虽然包含多达5种不同的IAV-S毒株，但已被证明是不合适的，因为连续的抗原漂移和/或转移将产生新出现的毒株。