[发明专利]靶向人和小鼠INSL5的化合物和方法

说明书

本发明提供靶向胰岛素样肽‑5(INSL5)的化合物和方法，包括抗体、包含编码所述抗体的DNA的细胞和载体以及用于产生所述抗体的方法。另外，本发明提供INSL5抗体在诊断测定法中的用途。

本发明涉及医疗领域。更具体地，本发明涉及包括针对人或小鼠胰岛素样肽-5(INSL5)的抗体或其片段的化合物、诊断学和方法。本发明的化合物和方法预期可用于以下领域：肿瘤学、生殖疾病和代谢性疾病，例如，糖尿病和肥胖症，包括涉及其的诊断学。

胃肠激素INSL5属于松弛素/胰岛素样家族肽。像其他INSL家族成员，INSL5由两个二硫键连接的B链和A链组成。INSL5表达在各种组织中；然而，它主要随远端肠中、尤其结肠和直肠中来自特化肠内分泌细胞(EEC)(称作L细胞)的其他激素一起共分泌。这些细胞调节代谢过程及生理过程如肠活动能力、激素分泌、葡萄糖稳态和食欲。INSL5是受体RXFR4/GPCR142/GPR100的配体并且其受体-配体相互作用导致抑制胞内cAMP水平。尽管将INSL5视为一种促进食欲的(刺激食欲的)激素并且卡路里限制使其分泌升高，INSL5-RXFP4激活信号传导途径的生物学结果仍很大程度上未阐明。

为了研究INSL5，需要可靠和灵敏的INSL5测定法。已经在代谢功能障碍、多囊卵巢综合征(PCOS)、结直肠癌(CRC)和不育患者及这些疾病的临床前模型中研究INSL5。然而，仍需要提供结合人和小鼠INSL5的抗体来进一步研究这些影响。具体地，仍需要对人和小鼠INSL5均具有高亲和力的INSL5抗体。目前可用的测定法具有灵敏度问题、重现性问题、性能问题和/或定量问题。因此，需要测试人类样品或小鼠样品的额外方法。

在本公开的一个具体实施方案中，提供结合INSL5的抗体，所述抗体包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，其中VH包含重链互补决定区(HCDR)HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且VL包含轻链互补决定区(LCDR)LCDR1、LCDR2和LCDR3，其中HCDR1包含TASGFSLSSYDMG(SEQID NO:10)，HCDR2包含TISAGGYTY(SEQ ID NO:11)，HCDR3包含ARERWNYDRSGGAGAGYFDL(SEQID NO:12)，LCDR1包含QASQSITSSYLS(SEQ ID NO:14)，LCDR2包含YPAANLAS(SEQ ID NO:15)并且LCDR3包含LYGYFSSSIDFA(SEQ ID NO:16)。

根据一些实施方案，本公开的抗体包含含有SEQ ID NO:9的VH和含有SEQ ID NO:13的VL。根据一些实施方案，本公开的抗体包含含有SEQ ID NO:5的重链(HC)和含有SEQ IDNO:7的轻链(LC)。根据一些实施方案，本公开的抗体包含含有SEQ ID NO:5之氨基酸2-446的重链(HC)和含有SEQ ID NO:7的轻链(LC)。根据一些实施方案，本公开的抗体包含由SEQID NO:5组成的HC和由SEQ ID NO:7组成的LC。

根据一些实施方案，本公开提供一种核酸，其包含编码SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7或两者的序列。根据一些实施方案，一种或多种向载体包含一种或多种编码SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7或两者的核酸。根据一些实施方案，本公开提供包含第一载体和第二载体的组合物，所述第一载体包含编码SEQ ID NO:5的核酸序列，所述第二载体包含编码SEQ IDNO:7的核酸序列。根据其他实施方案，本公开提供一种包含载体的组合物，所述载体包含编码SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:7的核酸。在另一个实施方案中，本公开提供包含一种或多种载体的细胞，所述载体包含一种或多种编码SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7或两者的核酸。根据一些实施方案，本公开提供包含第一载体和第二载体的细胞，所述第一载体包含编码SEQID NO:5的核酸序列，所述第二载体包含编码SEQ ID NO:7的核酸序列。根据其他实施方案，本公开提供包含载体的细胞，所述载体包含编码SEQ ID NO:5的核酸和编码SEQ ID NO:7的第二核酸序列。在其他实施方案中，细胞是哺乳动物细胞。