[发明专利]目标蛋白质的回收方法及制造方法

说明书

本发明公开在质外体中表达的目标蛋白质的回收方法，其包括下述工序：从在质外体中表达目标蛋白质的植物体的气孔、水孔或截面向植物体内部注入缓冲液的工序；以及，从气孔、水孔或截面提取植物体内部的缓冲液的工序。

技术领域

本发明涉及目标蛋白质的回收方法及制造方法。

背景技术

已开发出利用基因重组技术等使植物体中表达目标蛋白质并回收所表达的目标蛋白质的方法。在利用了植物体的以往的目标蛋白质的回收及制造中，例如，大多如非专利文献1那样，采用通过使植物的叶破碎来提取大部分的植物成分的方法。

然而，对于伴有植物体的破碎的以往的方法而言，在通过使植物体破碎而得到的提取液中，除了目标蛋白质以外还包含植物残渣等来自植物的不溶性异物及水溶性的杂质，因此需要用于将它们除去的纯化工序。如非专利文献2中记载的那样，想要增多目标蛋白质的提取量时，不必要的植物成分增加，该纯化工序的负荷增大。

现有技术文献

非专利文献

非专利文献1：Marillonnet等.“In planta engineering of viral RNAreplicons:efficient assembly by recombination of DNA modules delivered byAgrobacterium.”,Proc Natl Acad Sci U S A.,2004Oct26；101(43):15546

非专利文献2：Dixon等.“The Impact of Six Critical Impurities onRecombinant Protein Recovery and Purification from Plant Hosts”,MolecularPharming:Applications,Challenges,and Emerging Areas,2018,137-180

发明内容

发明所要解决的课题

因此，本发明的目的在于提供不需要破碎植物体的、回收目标蛋白质的方法及目标蛋白质的制造方法。

用于解决课题的手段

本申请的发明人发现，通过从在质外体中表达目标蛋白质的植物体的气孔、水孔或截面向植物体内部注入缓冲液，从气孔、水孔或截面提取植物体内部的缓冲液，从而能够在不将植物体破碎的情况下回收在质外体中表达的目标蛋白质。本发明是基于该新见解而完成的。

即，本发明涉及例如以下的各发明。

[1]

在质外体中表达的目标蛋白质的回收方法，其包括下述工序：

从在质外体中表达目标蛋白质的植物体的气孔、水孔或截面向植物体内部注入缓冲液的工序；以及

从气孔、水孔或截面提取植物体内部的缓冲液的工序。

[2]

如[1]所述的方法，其中，从气孔、水孔或截面向植物体内部注入缓冲液的工序包括通过加压或减压来注入缓冲液。

[3]

如[1]或[2]所述的方法，其中，从气孔、水孔或截面提取植物体内部的缓冲液的工序包括通过加压或减压来提取缓冲液。

[4]

如[1]所述的方法，其中，从气孔、水孔或截面向植物体内部注入缓冲液的工序包括通过加压或减压来注入缓冲液，

从气孔、水孔或截面提取植物体内部的缓冲液的工序包括通过加压或减压来提取缓冲液，