[发明专利]犬抗体变体

说明书

本发明大体上涉及犬抗体变体和其用途。确切地说，本发明涉及犬抗体恒定区中用于改良其半衰期和其它特征的突变。

相关申请的交叉参考

本申请要求2020年9月28日申请的美国临时专利申请第63/084241号的优先权和权益，所述美国临时专利申请特此以全文引用的方式并入本文中。

技术领域

本发明大体上涉及犬抗体变体和其用途。确切地说，本发明涉及犬抗体的Fc恒定区中用于改良半衰期的突变。

背景技术

犬IgG单克隆抗体(mAb)将研发作为兽医学中的有效治疗剂。几年前，鉴别且表征四种犬IgG子类(Bergeron等人，2014，Vet Immunol Immunopathol.第157(1-2)卷，第31至41页)。然而，并未对延长犬IgG的半衰期的进行足够研究。

经由再循环机制，新生儿Fc受体(FcRn)以与其片段可结晶(Fc)区的pH依赖性相互作用延长IgG的半衰期。确切地说，跨越CH2和CH3域的界面的Fc区与细胞表面上的FcRn相互作用以调节IgG内环境稳定。IgG胞饮作用之后的酸性相互作用有助于此相互作用且因此避免IgG降解。内吞IgG接着再循环回至细胞表面且以碱性pH经释放进入血流中，从而保持足够的血清IgG以发挥恰当功能。因此，IgG的药物动力学概况视其Fc区的结构和功能特性而定。

三种犬IgG子类结合犬FcRn且已经与人类IgG类似物进行比较。犬IgG的半衰期仍需要进行充分研究，因为在无任何实验支持的情况下，我们不能预期或预测其是否将与人类IgG紧密对准。

延长IgG的半衰期可允许抗体药物的不太频繁给药和/或较低剂量，其继而减少兽医问诊，提高患者顺应性，且降低浓度依赖性细胞毒性/不良事件。

因此，需要鉴别Fc恒定区中用以提高半衰期的突变。

发明内容

本发明涉及突变犬IgG，相对于野生型犬IgG，所述突变犬IgG提供更高的FcRn亲和力和更高的半衰期。确切地说，本申请的本发明人已发现用另一氨基酸取代位置434的氨基酸残基天冬酰胺(Asn或N)出人意料地且未预期地增强针对FcRn的亲和力，且从而延长IgG的半衰期。

在一个方面中，本发明提供一种经修饰的IgG，其包含：相对于野生型犬IgG恒定域，包含至少一个氨基酸取代的犬IgG恒定域，其中所述取代处于根据如Kabat中的EU索引编号的氨基酸残基434。在一个示例性实施例中，所述取代为位置434的天冬酰胺经组氨酸取代。

在另一方面中，本发明提供一种多肽，其包含：相对于野生型犬IgG恒定域，包含至少一个氨基酸取代的犬IgG恒定域，其中所述取代处于根据如Kabat中的EU索引编号的氨基酸残基434。

在又一方面中，本发明提供一种抗体或分子，其包含：相对于野生型犬IgG恒定域，包含至少一个氨基酸取代的犬IgG恒定域，其中所述取代处于根据如Kabat中的EU索引编号的氨基酸残基434。

在另一方面中，本发明提供一种用于产生或制造抗体或分子的方法，所述方法包含：提供具有包含犬IgG恒定域的抗体的载体或宿主细胞，相对于野生型犬IgG恒定域，所述犬IgG恒定域包含至少一个氨基酸取代。其中所述取代处于根据如Kabat中的EU索引编号的氨基酸残基434。

在另一方面中，本发明提供一种用于延长犬的抗体血清半衰期的方法，所述方法包含：向所述犬施用治疗有效量的包含犬IgG恒定域的抗体，相对于野生型犬IgG恒定域，所述犬IgG恒定域包含至少一个氨基酸取代，其中所述取代处于根据如Kabat中的EU索引编号的氨基酸残基434。在一个示例性实施例中，所述抗体使半衰期延长约30天。