[发明专利]用于从发酵液中纯化酸性母乳寡糖的方法

权利要求书

1.一种用于从发酵液中纯化酸性母乳寡糖(HMO)的方法，该方法包括以下步骤：

(i)从该发酵液中分离生物质以提供粗溶液；

(ii)使该粗溶液经受使用呈H⁺形式的阳离子交换材料的阳离子交换，从而获得pH在1-3范围内的溶液；

(iii)使该pH在1-3范围内的溶液经受使用呈Cl^-形式的弱碱性阴离子交换材料的阴离子交换，从而获得pH在1.5-5.5、优选1.5-4范围内的溶液；

(iv)使该pH在1.5-5.5、优选1.5-4范围内的溶液经受使用吸附性材料的吸附以便去除中性有机化合物；

(v)任选地将该已经受吸附的溶液的pH调节至在5-6范围内的值；

(vi)任选地使该溶液经受使用阴离子交换树脂的阴离子交换，从而将该酸性母乳寡糖与该树脂结合，随后使用盐溶液从该树脂中洗脱该酸性母乳寡糖，该任选的步骤在步骤(iii)与步骤(iv)之间或在步骤(iv)与步骤(v)之间进行；

从而获得包含所述酸性母乳寡糖的纯化溶液。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，该酸性母乳寡糖选自由以下组成的组：6’-唾液乳糖(6’-SL)、3’-唾液乳糖(3’-SL)、二唾液乳糖-N-四糖、3’-唾液酸-3-岩藻糖基乳糖、和唾液乳糖-N-四糖，更优选地选自6’-唾液乳糖(6’-SL)和3’-唾液乳糖(3’-SL)。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中，步骤(ii)中的该阳离子交换材料是强酸阳离子交换材料，优选选自由凝胶型苯乙烯/二乙烯基苯阳离子交换树脂组成的组的强酸阳离子交换材料，更优选具有苯乙烯/二乙烯基苯凝胶型基质和磺酸官能团的强酸阳离子交换树脂。

4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，步骤(iii)中的该弱碱性阴离子交换材料选自由以下组成的组：具有叔胺、优选二甲胺官能团的丙烯酸凝胶型基质和苯乙烯/二乙烯基苯凝胶型基质。

5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，步骤(iv)中的该吸附性材料是弱阳离子交换材料，其优选地选自由苯乙烯/二乙烯基苯共聚物基质和磺酸官能团组成的组并且具有0.8至1.2ml/g、更优选0.9至1.1ml/g、并且最优选0.95至1.05ml/g的孔隙率，和/或≥600m²/g、更优选≥650m²/g、甚至更优选≥670m²/g并且最优选≥700m²/g的BET表面积。

6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，步骤(vi)中的该阴离子交换树脂是弱碱性阴离子交换树脂，其优选地选自由以下组成的组：具有叔胺、优选二甲胺官能团的丙烯酸凝胶型基质和苯乙烯/二乙烯基苯凝胶型基质。

7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，步骤(i)包括使用截留分子量为5kDa或更少、优选3kDa或更少、最优选3kDa的膜。

8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，步骤(i)包括微滤步骤，其在20℃-75℃范围内、优选在30℃-70℃范围内、特别地在40℃-50℃范围内或在60℃-70℃范围内的温度下进行。

9.根据权利要求8所述的方法，其中，在步骤(ii)之前使MF渗透物经受冷却步骤。

10.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，步骤(vi)中的该阴离子交换树脂呈OH^-形式。

11.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，该方法进一步包括使该纯化溶液经受纳滤和/或反渗透。

12.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，使该纯化溶液–任选地在一个或多个另外的处理步骤之后–经受干燥或结晶步骤、优选喷雾干燥步骤。