[发明专利]含血红素的细胞培养基及其用途

说明书

本公开提供了包含产血红素蛋白的C1代谢非光合细菌的生物质或其衍生物的培养基或发酵培养基，用培养基或发酵培养基培养细胞或组织的方法，以及通过培养方法产生的产物，产物包括食物产品、食物成分、植物保护性细菌细胞产物以及如维生素、脂肪酸、氨基酸、类胡萝卜素等其他感兴趣的产物。

背景技术

发酵和细胞或组织培养涉及在生长培养基中培养细胞或组织，生长培养基包含细胞存活或生长所需的营养物。酵母提取物、蛋白胨以及动物血清通常用作发酵、细胞和组织培养的营养物来源。然而，这些营养物来源可能受成本限制，或者缺乏一些促进细胞最佳生长的营养物。需要用于发酵和细胞或组织培养的其他营养物来源来支持有效的商业化生产过程。

发明内容

本公开提供了细胞或组织培养基或发酵培养基及其成分，包含产血红素蛋白的C₁代谢非光合细菌的生物质或其衍生物，使用培养基或发酵培养基的方法，以及由使用培养基和发酵培养基的方法产生的如食物成分等产物。

附图说明

本专利或申请文件包含至少一个彩色附图。经请求并且支付必要费用后，专利局将提供具有(多个)彩色附图的本专利或专利申请公开的副本。

图1是根据实施例1的4个自溶产物样品(样品B135、B139、B140和B141)的分子量分布图，自溶产物样品由产血红素蛋白的C₁代谢非光合细菌(荚膜甲基球菌巴斯(Methylococcus capsulatus Bath))的生物质产生。样品B145是未经历自溶的生物质匀浆的样品。

图2是通过分光光度法测量的两种海洋栖居细菌(海摩替亚氏菌(Moritellamarina)以及肺鲐希瓦氏菌(Shewanella pneumatophori))以及裂殖壶菌属物种(Schizochytriumsp.)ATCC 20888的细胞生长图，这些细菌各自在不含产血红素蛋白的C₁代谢非光合细菌(荚膜甲基球菌巴斯)的生物质或由生物质产生的自溶产物的培养基中培养，在含生物质的培养基(“生物质培养基”)中培养，或在含由生物质产生的自溶产物的培养基(“自溶产物培养基”)中培养。参见实施例2。

图3是由海摩替亚氏菌(Moritella marina)、肺鲐希瓦氏菌(Shewanellapneumatophori)以及裂殖壶菌属物种ATCC 20888产生的二十碳五烯酸(EPA–C20:5(n-3))和二十二碳六烯酸(DHA–C22:6(n-3))的浓度图，这些细菌各自在不含荚膜甲基球菌巴斯的生物质或由生物质产生的自溶产物的培养基中培养，在含生物质的培养基(“生物质培养基”)中培养，或在含由生物质产生的自溶产物的培养基(“自溶产物培养基”)中培养，以及这样的海洋栖居生物的细胞生长。参见实施例3。

图4A和4B是地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)(ATCC 53757)的图A)：通过在BioLector中培养，在不含产血红素蛋白的C₁代谢非光合细菌(荚膜甲基球菌巴斯)(“基质”)的生物质或由生物质产生的自溶产物(“B199”)或含由添加蛋白酶的生物质产生的自溶产物(“B223”)的培养基中培养来测量的细胞生长，以及B)：A)中培养物的溶解氧痕迹。这些图表示在最高浓度(0.1g/L N)下含和不含自溶产物生长的重复培养物。参见实施例4。

图5是杰丁毕赤酵母(Pichia jadini)(CBS 4511)细胞生长的图，通过在BioLector中培养，在不含产血红素蛋白的C₁代谢非光合细菌(荚膜甲基球菌巴斯)(“基质”)的生物质或由生物质产生的自溶产物(“B199”)或含由添加蛋白酶的生物质产生的自溶产物(“B223”)的培养基中培养来测量。该图表示在最高浓度(0.1g/L N)下含和不含自溶产物生长的重复培养物。参见实施例4。