[发明专利]一种索烃化的VAR2CSA重组蛋白及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种索烃化的VAR2CSA重组蛋白，其特征在于，所述索烃化的VAR2CSA重组蛋白包括结合域、SpyTag、p53dim domain和SpyCatcher；

所述结合域包括VAR2CSA蛋白中与胎盘样硫酸软骨素A结合的结构域；

所述索烃化的VAR2CSA重组蛋白的多肽序列为SEQ ID NO.8所示的序列。

2.一种权利要求1所述的索烃化的VAR2CSA重组蛋白的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：

构建含有权利要求1所述的索烃化的VAR2CSA重组蛋白的编码基因的表达载体，将所述表达载体转入细胞中，培养细胞并进行蛋白纯化，得到所述索烃化的VAR2CSA重组蛋白。

3.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子为权利要求1所述的索烃化的VAR2CSA重组蛋白的编码基因；

所述索烃化的VAR2CSA重组蛋白的编码基因为如SEQ ID NO.11所示的脱氧核糖核酸序列或与其具有至少80%以上核苷酸同一性的变体。

4.一种嵌合抗原受体细胞体系，其特征在于，所述嵌合抗原受体细胞体系包括权利要求1所述的索烃化的VAR2CSA重组蛋白和嵌合抗原受体细胞；

所述嵌合抗原受体细胞表达识别所述索烃化的VAR2CSA重组蛋白的嵌合抗原受体；

所述细胞为免疫效应细胞，所述免疫效应细胞包括T细胞、B细胞、NK细胞、树突状细胞或巨噬细胞中的任意一种或至少两种的组合。

5.根据权利要求4所述的嵌合抗原受体细胞体系，其特征在于，所述嵌合抗原受体包括识别所述索烃化的VAR2CSA重组蛋白的结构域；

所述嵌合抗原受体还包括铰链区、跨膜区和胞内共刺激信号区；

所述识别所述索烃化的VAR2CSA重组蛋白的结构域包含由重链可变区和轻链可变区组成的单链抗体；

编码所述单链抗体重链可变区的基因为如SEQ ID NO.14所示的脱氧核糖核酸序列；

编码所述单链抗体轻链可变区的基因为如SEQ ID NO.15所示的脱氧核糖核酸序列；

所述铰链区为人CD8α铰链区；

所述跨膜区为人CD28跨膜区；

所述胞内共刺激信号区为人CD27胞内信号区、人CD134胞内信号区、人CD28胞内信号区或人4-1BB胞内信号区中的任意一种或至少两种的组合；

所述嵌合抗原受体的氨基末端含有一个CD8α信号肽；

所述嵌合抗原受体的羧基末端还包含一个人CD3ζ胞内信号区；

所述嵌合抗原受体包含从蛋白N-端到C-端依次串联的CD8α信号肽、识别所述索烃化的VAR2CSA重组蛋白的单链抗体、人CD8α铰链区、人CD28跨膜区、人CD28胞内信号区、人4-1BB胞内信号区和人CD3ζ胞内信号区；

所述嵌合抗原受体为如SEQ ID NO.16所示的多肽序列。

6.一种嵌合抗原受体细胞，其特征在于，所述嵌合抗原受体细胞表达识别权利要求1所述索烃化的VAR2CSA重组蛋白的嵌合抗原受体。

7.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括如权利要求1所述的索烃化的VAR2CSA重组蛋白、如权利要求3所述的核酸分子、如权利要求4所述的嵌合抗原受体细胞体系或如权利要求6所述的嵌合抗原受体细胞中任意一种或至少两种的组合；

所述药物组合物还包括药学上可接受的辅料。

8.如权利要求1所述的索烃化的VAR2CSA重组蛋白、如权利要求3所述的核酸分子、如权利要求4所述的嵌合抗原受体细胞体系、如权利要求6所述的嵌合抗原受体细胞或如权利要求7所述的药物组合物在制备治疗肿瘤的药物中的应用；

所述肿瘤为表达胎盘样硫酸软骨素A的实体肿瘤和/或血液肿瘤。