[发明专利]影响疆南绒山羊羊绒纤维直径性状的分子标记及其特异性引物对和应用在审

专利信息
申请号: 202210015123.7 申请日: 2022-01-07
公开(公告)号: CN114250309A 公开(公告)日: 2022-03-29
发明(设计)人: 田可川;吴翠玲;付雪峰;刘桂芬;张果平;魏晨;秦崇凯;石刚;薛多雄;何军敏;刘静;毛静艺 申请(专利权)人: 山东省农业科学院畜牧兽医研究所;新疆畜牧科学院畜牧研究所
主分类号: C12Q1/6888 分类号: C12Q1/6888;C12N15/11
代理公司: 乌鲁木齐合纵专利商标事务所 65105 代理人: 周星莹;谭南
地址: 250100 *** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 影响 绒山羊 羊绒 纤维 直径 性状 分子 标记 及其 特异性 引物 应用
【权利要求书】:

1.一种影响疆南绒山羊羊绒纤维直径性状的分子标记,其特征在于其位于疆南绒山羊1号染色体的KRTAP24-1基因上,KRTAP24-1基因位于1号染色体核苷酸序列的第4033765bp-4034298bp处,所述分子标记位于1号染色体核苷酸序列的4034201bp处,突变碱基为C或T。

2.一种用于扩增权利要求1所述的影响疆南绒山羊羊绒纤维直径性状的分子标记的特异性引物对,其特征在于包括上游引物和下游引物,

上游引物:5’-tggtgtgacatagaccaaagagcta-3’;

下游引物:5’-ctcttggataagcagttaagttgcc-3’。

3.一种权利要求2所述的特异性引物对在制备体外检测影响疆南绒山羊羊绒羊绒纤维直径性状的分子标记的试剂或试剂盒的应用。

4.一种权利要求1所述的影响疆南绒山羊羊绒纤维直径性状的分子标记在疆南绒山羊羊绒纤维直径性状选择中的应用。

5.根据权利要求4所述的影响疆南绒山羊羊绒纤维直径性状的分子标记在疆南绒山羊羊绒纤维直径性状选择中的应用,其特征在于包括下述步骤:第一步,取待测疆南绒山羊的基因组DNA;第二步,以基因组DNA为模板,利用特异性引物对进行第一轮扩增,第一轮PCR体系为25μl的反应体系,第一轮PCR体系由下列成分组成:

第一轮PCR扩增条件为:98度预变性3分钟,然后执行8个循环,循环条件是94度变性30秒,50度退火30秒,72度延伸30秒;紧接着执行25个循环,循环条件是98度变性30秒,66度退火30秒,72度延伸30秒;最后72度延伸5分钟,PCR反应完成后,4度保温,

上游引物池:5’-tggtgtgacatagaccaaagagcta-3’;

下游引物池:5’-ctcttggataagcagttaagttgcc-3’;

第三步,以第一轮PCR产物为模板执行第二轮PCR反应,第二轮PCR体系为30μl的反应体系,第二轮PCR体系由下列成分组成:

第二轮PCR扩增条件为:98度预变性5分钟,然后执行5个循环,循环条件是变性94度30秒,55度退火20秒,72度延伸30秒,最终72度延伸5分钟,PCR反应完成后,4度保温,各个PCR产物等量混合后,进行测序,根据测序结果进行基因分型,对于羊绒纤维直径性状,所述分子标记对应的基因型中,含有T基因的TT或CT基因型的疆南绒山羊属于羊绒纤维直径性状较细的优势个体。

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