[发明专利]一种检测肿瘤的标志物及在制备检测肿瘤试剂中的应用

说明书

本发明公开了一种检测肿瘤的标志物，包括p‑S351‑Rasal2，所述p‑S351‑Rasal2表示Rasal2蛋白第351位磷酸化的多肽序列，如SEQ ID NO.1所示。将p‑S351‑Rasal2应用于制备检测肿瘤的试剂和系统中，可以提高检测肿瘤的准确性。

技术领域

本发明涉及肿瘤标志物检测技术领域，更具体地说是涉及一种检测肿瘤的标志物及在制备检测肿瘤试剂中的应用。

背景技术

肿瘤是严重威胁人类健康的疾病，大部分的肿瘤在确诊时已经到了晚期，失去了手术的意义。因此肿瘤的早期诊断和综合治疗可以显著提高疗效和改善预后。肿瘤标志物是肿瘤细胞产生或宿主对肿瘤刺激异常产生或表达的一类特异性物质，对肿瘤的临床诊断、治疗和预后监测起重要作用。

目前比较公认的肿瘤标志物包括组织特异性的标志物，如雌激素受体ER(乳腺癌)、前列腺特异性抗原PSA(前列腺癌)等，也包括多组织通用的标志物如上皮生长因子受体EGFR(结直肠癌、肺癌等)、原癌基因Her-2/neu(乳腺癌、胃癌等)。部分肿瘤标志物还可用于预测对治疗措施(包括药物化疗、放射治疗、免疫治疗)的敏感性。除了传统的蛋白类标志物以外，近年随着新技术的发展和新概念的提出，部分核酸类分子如miRNA也可作为肿瘤标志物。

众所周知，Ras过度激活是导致肿瘤发生和发展的一个重要因素。Ras GAPs通过增加Ras GTPase酶活性促进GTP转化为GDP从而抑制Ras的活性。Rasal2属于Ras GAPs的一种，因此被认为是一种肿瘤抑制因子，在大部分的癌症组织中表达偏低，如管腔B型乳腺癌、肺癌、卵巢癌、膀胱癌和鼻咽癌等等。然而，在三阴性乳腺癌(TNBC)中，Rasal2过表达，同时促进肿瘤的侵袭，发挥致癌作用。在结直肠癌，Rasal2通过上调LATS2/YAP1信号通路，能够促进结直肠癌的发生和发展。因此，Rasal2在癌症中的作用与肿瘤的不同类型以及同种肿瘤的不同亚型有关。

在研究Rasal2的信号通路过程中，即使Rasal2蛋白表达与肿瘤的种属有关，然而Rasal2第351位磷酸化，却能够有效的诱导自噬的形成，从而增加肿瘤对于外界应激的抵抗和耐药性的产生，促进肿瘤的发生和发展。相比于Rasal2表达对肿瘤发生和发展的影响存在抑制或促进的两种矛盾的作用方式，Rasal2第351位磷酸化在肿瘤有着普遍的一致性，并且Rasal2磷酸化与Rasal2表达量的比值(即：p-S351-Rasal2/Rasal2)在正常细胞和组织几乎接近于0，而在肿瘤细胞和组织中却有很高的表达，并且该比值与肿瘤的耐药性，肿瘤的级别，分化程度以及预后均呈明显正相关。因此，Rasal2第351位磷酸化水平与Rasal2蛋白表达水平的比值(即：p-S351-Rasal2/Rasal2)的高低，能够预示肿瘤的发生和发展，以及对化疗产生耐药性能力的强弱，具有重要的临床应用意义。

因此，如何提供一种新的肿瘤标志物并将其应用于检测肿瘤中是本领域技术人员亟需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种检测肿瘤的标志物p-S351-Rasal2，并通过计算Rasal2蛋白第351位磷酸化多肽序列的表达水平与Rasal2蛋白表达水平的比值确定肿瘤的发生和发展情况。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种检测肿瘤的标志物包括p-S351-Rasal2，所述p-S351-Rasal2表示Rasal2蛋白第351位磷酸化的多肽序列，所述序列为IFARTTS(p)KTKADNI，如SEQ ID NO.1所示。

作为与上述技术方案相同的发明构思，本发明还请求保护p-S351-Rasal2在制备检测肿瘤试剂中的应用。

作为与上述技术方案相同的发明构思，本发明还请求保护一种检测肿瘤的试剂，包括：与p-S351-Rasal2多肽序列特异性结合的多克隆抗体蛋白。

一种检测肿瘤标志物的引物，所述引物序列为：