[发明专利]一种基于乡土菌群和特定菌群制备锑矿区复合菌液方法

权利要求书

1.一种基于乡土菌群和特定菌群制备锑矿区复合菌液方法，其特征在于：具体包括以下步骤：

步骤一、样本筛选：从锑矿区选取五种特定生境的土壤，包括：超富集植物和非富集植物的根际土、先锋植物的根际土和矿渣土、不同自然演替阶段植物的根际土、耕作农田和弃耕农田的根际土与污水处理前后的淤泥土，在选取的五种特定生境土壤中取出样本土，作为不同生境下的土壤实验用土；

步骤二、乡土菌群确定及培养：利用宏基因组技术对步骤一中不同生境下的土壤实验用土进行菌群属相对丰度的测定，确定乡土菌群的类型，将不同生境下的土壤实验用土加入已灭菌并装有玻璃珠的含锑、砷、镉、汞、铅混合物液体培养基中，振荡培养10d后，再次接入含锑、砷、镉、汞、铅混合物的液体培养基中，振荡培养10d，重复5次，每次液体培养基中的锑、砷、镉、汞、铅混合物等含量成倍增加；

步骤三、乡土菌群制备：观察步骤二中培养基中的菌落特征，根据有差异的乡土菌落特征，结合确定的乡土菌群类型，从培养基中挑选有差异的乡土菌落，将有差异的乡土菌落以10倍比稀释法稀释后涂布于分离纯化培养基平板上，进行混合培养，制得乡土菌群；

步骤四、复合菌液制备：在步骤三中制得的乡土菌群中按照不同比例加入特定菌群，混合培养后，将菌液与甘油按照1:1的比例混合，制成含有不同配比的乡土菌群和特定菌群复合菌液；

步骤五、土壤提升测定：将步骤四中制备的复合菌液施用于大田中，对不同配比的复合菌液对土壤质量的提升效果、对作物生长和肥料利用率的影响和降低农田重金属的程度进行判定，选择获得最优的乡土菌群和特定菌群配比；

步骤六、分析定稿：比较分析特定菌剂的投放量、投放时期对土壤质量的提升效果、作物的促生作用及作物累积农田重金属的程度的影响，组合成最优的含有乡土菌群和特定菌群的复合菌液的制备方法，制备出最优情况下的复合菌液。

2.根据权利要求1所述的一种基于乡土菌群和特定菌群制备锑矿区复合菌液方法，其特征在于：所述步骤一中取出样本土的方式为：在五种特定生境处分别设置三个1m*1m的格子，从格子中随机选取五个点取土。

3.根据权利要求1所述的一种基于乡土菌群和特定菌群制备锑矿区复合菌液方法，其特征在于：所述步骤二中对不同生境下的土壤实验用土进行菌群属相对丰度的测定后，通过方差分析，确定乡土菌群的类型。

4.根据权利要求1所述的一种基于乡土菌群和特定菌群制备锑矿区复合菌液方法，其特征在于：所述步骤四中的特定菌群包括固氮菌群、解磷菌群、纤维素降解菌群、植物根际促生菌群和降低植物对重金属吸收的菌群。

5.根据权利要求1所述的一种基于乡土菌群和特定菌群制备锑矿区复合菌液方法，其特征在于：所述步骤四中制得的复合菌液使用灭菌的冷冻管封装，并置于-80℃冰箱中保存。

6.根据权利要求1所述的一种基于乡土菌群和特定菌群制备锑矿区复合菌液方法，其特征在于：所述步骤五中不同配比的复合菌液对土壤质量的提升效果的判定依据为：土壤营养测定、土壤酶活测定、微生物活性测定、微生物多样性及功能测定。

7.根据权利要求1所述的一种基于乡土菌群和特定菌群制备锑矿区复合菌液方法，其特征在于：所述步骤五中不同配比的复合菌液对作物生长和肥料利用率影响的判定依据为：作物养分吸收及产量、肥料利用率。

8.根据权利要求1所述的一种基于乡土菌群和特定菌群制备锑矿区复合菌液方法，其特征在于：所述步骤五中不同配比的复合菌液降低农田重金属的程度的判定依据为：作物根、茎、叶和籽粒重金属含量。