[发明专利]靶向人B7-H3分子的人源化单克隆抗体及其应用

说明书

本发明提出一种抗人B7‑H3分子的人源化单克隆抗体，所述抗人B7‑H3单克隆抗体为hu4G4，包括重链和轻链，所述hu4G4的重链可变区(VH)的氨基酸序列与SEQ ID NO.1相同；hu4G4的轻链可变区(VL)的氨基酸序列与SEQ ID NO.2相同；该人源化抗体在小鼠荷瘤模型中能特异识别肿瘤细胞，偶联碘131能有效抑制胶质瘤荷瘤小鼠的肿瘤生长，为靶向B7‑H3分子的肿瘤免疫治疗提供治疗性抗体候选分子。

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，具体涉及一种靶向人B7-H3分子的人源化单克隆抗体及其应用。

背景技术

近年来，诸多临床研究表明B7-H3蛋白在正常组织中几乎不表达，却高表达在多种肿瘤组织，包括胶质瘤、肺癌、肠癌、肾癌以及前列腺癌组织中。加之上世纪80年代一株识别肿瘤相关抗原的单抗(克隆号：376.96)被鉴定出其识别的分子就是B7-H3，因此B7-H3被认为是一个广泛表达在肿瘤细胞表面的标志，被称为“肿瘤相关抗原”。已有大量研究表明，B7-H3的异常表达与多种肿瘤的不良预后相关，包括与病人生存率、疾病进展和病理分级等，并促进肿瘤的生长、转移和复发。

干扰肿瘤细胞中B7-H3的表达后发现B7-H3分子参与肿瘤细胞的生物学行为、糖酵解能力以及与肿瘤血管生成。尽管由于B7-H3的受体或相互作用的分子尚未明确，肿瘤细胞表达B7-H3的作用和机制也有待进一步研究，但肿瘤细胞表达的B7-H3可以直接介导肿瘤细胞生物学行为和代谢的调节。B7-H3已成为肿瘤免疫治疗中的最受关注的免疫检查点分子，也为肿瘤靶向治疗提供极具临床价值的靶点。

发明内容

本发明的目的是提供种一种靶向人B7-H3分子的人源化单克隆抗体及其应用，所提供的单克隆抗体可特异性识别人B7-H3分子，动物实验证实该单克隆抗体偶联碘131能有效抑制小鼠肿瘤的生长，从而为肿瘤细胞免疫治疗提供新治疗性抗体候选分子。

本发明所提供的特异性靶向人B7-H3的人源化单克隆抗体hu4G4，其包含有重链和轻链，其中重链CDR区包含有CDR-H1、CDR-H2和CDR-H3，其序列信息如下：

CDR-H1：DYYIN(SEQ ID NO：1)、

CDR-H2：FIRNRVNGYTTEYTASVKG(SEQ ID NO：2)、

CDR-H3：DRGPGKHAIDY(SEQ ID NO：3)；

轻链CDR区包含有CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，其序列信息如下：

CDR-L1：RAAQDLEYYLD(SEQ ID NO：4)、

CDR-L2：HSARMDS(SEQ ID NO：5)、

CDR-L3：QNGYILPYT(SEQ ID NO：6)；

更进一步的，所述的人源化单克隆抗体hu4G4，其重链可变区(VH)的氨基酸序列如下：

EVQLEESGGGLVRPGGSLRLSCAVSGFTLSDYYINWVRQPPGKALEWLGFIRNRVNGYTTEYTASVKGRFTISRDNSQSILYLQMNTLRAEDSATYYCARDRGPGKHAIDYWGQGTSVTVSS(SEQ ID NO：7)；

所述的人源化单克隆抗体hu4G4，其轻链可变区(VL)氨基酸序列如下：

DIQMTQSPSSLSASLGDRVTISCRAAQDLEYYLDWYQQKTDTTVKLLIYHSARMDSGVPARFSGSGSGRDYSLTISNLEPEDVGTYFCQNGYILPYTFGTGTKLEIK(SEQ ID NO：8)；