[发明专利]一种早期胃癌诊断标志物及其应用

说明书

本发明属于医学检验技术领域。本发明公开了一种新的用于诊断胃癌的特异性生物标志物microRNA‑330‑5p和检测方法，所述生物标志物microRNA‑330‑5p在用于胃癌检测时具有很好的灵敏度和特异性，尤其适用于早期胃癌的筛查，能满足临床上对早期胃癌的诊断需求，实现早确诊早治疗，提高患者的5年生存率。

技术领域

本发明涉及医学检测领域，特别是涉及一种早期胃癌诊断标志物及其应用。

背景技术

胃癌指源于胃黏膜上皮畑胞的恶性肿瘤，主要是胃腺癌，好发于中、老年人，发病高峰年龄在50-80岁，并呈逐年年轻化趋势，是全球高发的恶性肿瘤之一。胃癌可由多种因素影响，在慢性胃炎等各种胃部疾病，或幽门螺旋杆菌(Hp)感染，以及不良饮食习惯、环境和遗传等多种因素的作用下，都可导致胃癌的发生。胃癌的发病率随着年龄的增加而显著增高，发病的高峰年龄在50～80岁。我国是胃癌的高发区，发病率高达40/10万，仅次于肺癌，已经跃居中国癌症发病率的第二位，胃癌年患病率和死亡率均是世界平均水平的2倍多。胃癌占癌症死亡人数接近四分之一，缺乏早期诊断的方法以及容易产生耐药是其高致死率背后的主要原因。

依据TNM分期判定标准，胃癌可分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期。Ⅰ期为最早，Ⅳ期最晚。我们常听说的早期胃癌仅指第Ⅰ期，其余均称之为中晚期胃癌(又称为进展期胃癌)。早期胃癌无明显症状，随病情进展逐渐出现消化不良等胃部不适症状，胃癌早期症状多缺乏特异性，早期病例仅占胃癌手术病例的10％～20％，大约2/3的患者在确诊时已处于中晚期或出现淋巴结、血行转移，其5年生存率仅为20％～30％，而早期胃癌的5年生存率可达90％以上。因此，早诊断早治疗可以有效提高患者的生存率，减轻患者痛苦和社会经济负担。但是目前，胃癌的早期的发现率低，这主要与早期胃癌的症状不明显以及目前尚缺乏有效的早期胃癌检测手段有关。

目前对胃癌的检测方法主要包括：(1)早期胃癌三项检测：检测胃部腺体分泌的三种物质，即血清胃蛋白酶原Ⅰ、血清胃蛋白酶原Ⅱ，以及血清胃泌素17，能够反映胃部的萎缩情况，有助于胃癌早期的防治，但敏感度不高，存在漏检；(2)血清肿瘤标志物检测：结合癌胚抗原、癌抗原CA19-9、CA724、CA125等的检查，但这些传统标志物多在胃癌晚期才明显升高，所以诊断胃癌的阳性率较低，多在40％以下，且不适用于早期胃癌的检测；(3)胃镜检查：是目前诊断胃癌的“金标准”，大多数胃癌通过内镜检查加活检，能得到正确诊断，但仍有少部分胃癌，特别是小胃癌或微小胃癌可能被漏诊，且在胃镜检查过程中患者依从性差，不适反应多，限制了其作为胃癌筛查的临床应用；(4)影像学检查：包括CT检查、PET-CT检查、超声胃镜、X线钡餐等，但早期胃癌和癌前病变的影像学表现常缺乏特异性，故其在发现早期胃癌及微小病灶方面有一定的局限性；(5)病理活检：取一小部分组织做病理活检，镜下观察是否有癌细胞的存在，明确是否癌变，此方法为侵入式，患者依从性差，且不适用于胃癌的早期筛查。因此，寻找灵敏度高、特异性好、取材方便和适用性广的早期胃癌特异性生物学靶标成为胃癌防治迫切需要解决的问题。

MicroRNA(miRNA)是一类内生的长度约为20～24个核苷酸的小RNA，其在细胞分化、生物发育及疾病发生发展过程中发挥巨大作用。据推测，miRNA调节着人类三分之一的基因，每个miRNA可以有多个靶基因，而几个miRNA也可以调节同一个基因。miRNA存在多种形式，最原始的是pri-miRNA，长度大约为300～1000个碱基；pri-miRNA经过一次加工后，成为pre-miRNA即microRNA前体，长度大约为70～90个碱基；pre-miRNA再经过Dicer酶酶切后，成为长约20～24nt的成熟miRNA。研究表明miRNAs参与生命过程中一系列的重要进程，包括早期发育、细胞增殖、细胞凋亡、细胞死亡、脂肪代谢和细胞分化等，其在多种疾病中存在异常表达。随着对于miRNA作用机制的进一步的深入研究，以及利用miRNA芯片等高通量的技术手段对miRNA和疾病之间的关系进行研究，越来越多的miRNA正被发现可成为疾病诊断的特异性生物标记物，包括肿瘤、自身免疫性疾病、炎症性疾病和感染性疾病等。