[发明专利]一种宣肺败毒中药组合物的指纹图谱检测方法

权利要求书

1.一种宣肺败毒中药组合物的指纹图谱检测方法，其特征在于，所述指纹图谱检测方法包括如下步骤：

⑴、参照物溶液制备：取戟叶马鞭草苷、马鞭草苷、维采宁-2、虎杖苷、毛蕊花糖苷、柚皮苷、野漆树苷、甘草酸、大黄素对照品适量，加甲醇制成混合对照品溶液，即得；

⑵、供试品溶液制备：取中药组合物，研细，称定，加入60～80％甲醇，超声处理，放冷，再称定重量，用纯水补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

⑶、色谱检测条件：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，以乙腈为流动相A，0.1％甲酸溶液为流动相B，按如下规定比例进行梯度洗脱：洗脱时间为0min，流动相A的比例为5％，流动相B的比例为95％、洗脱时间为5min，流动相A的比例为10％，流动相B的比例为90％、洗脱时间为10～12min，流动相A的比例为13％，流动相B的比例为87％、洗脱时间为18min，流动相A的比例为19％，流动相B的比例为81％、洗脱时间为21min，流动相A的比例为21％，流动相B的比例为79％、洗脱时间为29min，流动相A的比例为40％，流动相B的比例为60％、洗脱时间为35min，流动相A的比例为30％，流动相B的比例为70％；检测波长为230～270nm；流速0.1～0.6ml/min；柱温为24～32℃；

(4)、分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，即得。

2.如权利要求1所述指纹图谱检测方法，其特征在于，所述步骤⑴参照物溶液制备中混合对照品溶液的浓度为：戟叶马鞭草苷250～450μg/ml、马鞭草苷250～450μg/ml、维采宁-2,30～60μg/ml、虎杖苷200～400μg/ml、毛蕊花糖苷50～100μg/ml、柚皮苷350～450μg/ml、野漆树苷10～50μg/ml、甘草酸80～120μg/ml、大黄素200～250μg/ml。

3.如权利要求2所述检测方法，其特征在于，所述步骤⑴参照物溶液制备中混合对照品溶液的浓度为：戟叶马鞭草苷365μg/ml、马鞭草苷373μg/ml、维采宁-244μg/ml、虎杖苷300μg/ml、毛蕊花糖苷85μg/ml、柚皮苷453μg/ml、野漆树苷25μg/ml、甘草酸100μg/ml、大黄素223μg/ml。

4.如权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述步骤⑵供试品溶液制备中所述甲醇浓度为70％。

5.如权利要求1所述指纹图谱检测方法，其特征在于，所述步骤⑶色谱检测条件为：所述十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱的型号为：ACQUITY UPLC BEH C₁₈、ACQUITY UPLC Shield RP₁₈、ACQUITY HSS T3。

6.如权利要求5所述指纹图谱检测方法，其特征在于，所述步骤⑶色谱检测条件为：所述十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱的型号为：Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈。

7.如权利要求1所述指纹图谱检测方法，其特征在于，所述步骤⑶色谱检测条件为：检测波长为200～300nm；流速0.4ml/min；柱温为30℃。

8.如权利要求1所述指纹图谱检测方法，其特征在于，所述按照此检测方法生成的指纹图谱色谱峰呈现10个特征峰，其中色谱峰1为：马鞭草苷、色谱峰2为虎杖苷、色谱峰3为毛蕊花糖苷、色谱对照峰4为柚皮苷、色谱峰5为野漆树苷、色谱峰7为大黄素-8-O-β-D-吡喃糖苷、色谱峰9为甘草酸，色谱峰10为大黄素。