[发明专利]SlCYP707A基因作为负调控因子在促进番茄亚低温抗性中的应用在审
| 申请号： | 202210034884.7 | 申请日： | 2022-01-13 |
| 公开（公告）号： | CN114540407A | 公开（公告）日： | 2022-05-27 |
| 发明（设计）人： | 夏晓剑;安晟民;周艳虹;喻景权 | 申请（专利权）人： | 安庆市长三角未来产业研究院;浙江大学 |
| 主分类号： | C12N15/84 | 分类号： | C12N15/84;C12N15/53;C12N15/113;A01H5/00;A01H6/82 |
| 代理公司： | 杭州知闲专利代理事务所(特殊普通合伙) 33315 | 代理人： | 万静 |
| 地址： | 24600*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | slcyp707a 基因 作为 调控 因子 促进 番茄 低温 抗性 中的 应用 | ||
1.SlCYP707A基因作为负调控因子在提高番茄亚低温抗性中的应用，其特征在于，所述SlCYP707A基因为SlCYP707A1基因和SlCYP707A2基因中的至少一个；所述SlCYP707A1基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，SlCYP707A2基因的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用的途径为通过敲除SlCYP707A1基因或SlCYP707A2基因获得单突变体，或者将SlCYP707A1基因的单突变体和SlCYP707A2基因的单突变体进行杂交获得纯合双突变体，使番茄突变体的亚低温抗性提高。
3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用的途径为通过敲除SlCYP707A1基因或SlCYP707A2基因获得单突变体，或者将SlCYP707A1基因的单突变体和SlCYP707A2基因的单突变体进行杂交获得纯合双突变体，降低叶片相对电解质渗透率和/或最大光化学效率，从而提高番茄突变体的亚低温抗性。
4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述敲除的手段为CRISPR/Cas9基因编辑技术。
5.如权利要求1所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：
(1)设计SlCYP707A基因的靶序列，构建CRISPR/Cas9载体；
所述靶序列sgRNA1的核苷酸序列如SEQ ID NO.5或SEQ ID NO.6所示；
(2)构建含步骤(1)所述CRISPR/Cas9载体的农杆菌基因工程菌；
(3)将步骤(2)所述基因工程菌转化番茄子叶，获得不含外源Cas9蛋白且稳定遗传的纯合单突变体株系。
6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，还包括步骤(4)：将SlCYP707A1基因的单突变体和SlCYP707A2基因的单突变体进行杂交，获得F1代，自交得到F2代，通过测序技术从F2代分离群体中找到同时缺失SlCYP707A1和SlCYP707A2基因的纯合双突变体植株。
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