[发明专利]用于检测玉米转化事件“浙瑞8”的核酸序列及其检测方法

说明书

本发明公开了一种用于检测转基因玉米事件“浙瑞8”的核酸序列及其检测方法，所述核酸序列包括SEQ ID NO.1或其互补序列、和/或SEQ ID NO.2或其互补序列，所述核酸序列来自于转基因玉米事件“浙瑞8”，所述转基因玉米事件“浙瑞8”以种子形式保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号：CCTCC NO:P202202。“浙瑞8”能够抵抗玉米常见鳞翅目害虫的危害，并对草甘膦具有较好的耐受性。本发明提供的核苷酸序列设计特异性检测引物对，应用核酸扩增方法准确、稳定鉴定出“浙瑞8”转基因事件的存在，能够实现对“浙瑞8”的研究、生产加工和应用进行溯源和全流程监管。

(一)技术领域

本发明涉及转基因玉米事件“浙瑞8”的核酸序列及其检测方法，具体的说，涉及一种抗虫耐除草剂转基因玉米事件“浙瑞8”和用于检测生物样品中是否包含特定转基因玉米事件“浙瑞8”的核酸序列及其检测方法。

(二)背景技术

玉米是一种重要的粮食作物，是全球种植范围最广、产量最大的谷类作物。但是在玉米种植过程中，害虫危害常常严重降低玉米产量和品质，增加玉米种植成本，严重影响玉米生产。防治玉米田间杂草也是玉米生产中一个重要的措施，利用除草剂控制杂草可以减少杂草对玉米生长的影响，稳定和提高玉米产量。通过基因工程方法将抗虫和耐除草剂性状导入到玉米中，获得抗虫耐除草剂的转基因玉米可以提高玉米生产效率，降低生产成本，减少杀虫剂的使用量。

转化事件是由外源基因在基因组插入位点的上下游侧翼区和外源基因构成的分子结构。在遗传转化时，因为外源基因随机整合到植物染色体中，因此获得的转基因群体包含大量的独立转化事件，不同的独立转化事件外源基因插入的染色体位置不同，外源基因侧翼序列也不同，每个事件都是独特的。外源基因在植物中的表达受到外源基因所插入的染色体位置的影响。这可能源自染色质结构或者整合位点附近调控元件的影响。相同基因在不同转化事件中的表达水平、表达空间和时间模式上也存在明显的差异。外源基因的插入也可能会影响内源基因的表达，从而对植物的农艺性状造成影响。因此，研发过程中需要筛选大量事件，并从中筛选出目标基因表达水平和表达模式能够满足生产应用需要的转化事件。筛选得到的理想转化事件可以通过杂交的常规育种方法，将转基因导入到商业种植的品种中。通过杂交方式产生的后代保持有原始转化事件的转基因特征。

对转化事件的特异性检测在转化事件的生产应用和法律法规监管上都有价值。常规的多核苷酸和蛋白检测的方法可以有效检测是否为转基因，但并不能区别不同的转化事件，特别是使用相同基因或相同转化载体产生的转化事件。只有针对插入基因和侧翼序列的检测才能够准确判断是否存在目标转基因事件。

(一)发明内容

本发明提供一种用于检测转基因玉米事件“浙瑞8”的核酸序列及其特异性检测方法，转基因玉米事件“浙瑞8”对玉米害虫具有良好的抗性，对草甘膦除草剂具有较好的耐受性，本发明所述核酸序列能够快速准确地鉴定生物样品中是否包含特定转基因玉米事件“浙瑞8”的DNA分子。

本发明采用的技术方案：

本发明提供一种用于检测转基因玉米事件“浙瑞8”的核酸序列，所述核酸序列包括SEQ ID NO.1或其互补序列、和/或SEQ ID NO.2或其互补序列，所述核酸序列来自于转基因玉米事件“浙瑞8”，所述转基因玉米事件“浙瑞8”以种子形式保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号：CCTCC NO:P202202，保藏日期2022年1月11日，地址中国武汉武汉大学，邮编430072。

SEQ ID NO.1

GAAACCGGTCCATGCTTAGACAAC。

SEQ ID NO.2

AAGTTGTCTAAGCGTCAATTTGTT。

进一步，优选所述核酸序列为SEQ ID NO.3或其互补序列、和/或SEQ ID NO.4或其互补序列。

SEQ ID NO.3