[发明专利]一种磁性细胞及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种磁性细胞，其中，所述细胞的细胞膜上结合有磁性纳米颗粒，使得所述细胞具有感应磁场的能力。

2.根据权利要求1所述的磁性细胞，其中，

所述细胞选自可以进行体外人工修饰的细胞，例如，红细胞、白细胞、血小板、癌细胞、胚胎干细胞、多能诱导干细胞，优选为红细胞；和/或

所述磁性纳米颗粒的平均直径为100～500nm，优选为200-300nm；和/或

所述磁性纳米颗粒是选自铁、钴、镍或其氧化物的纳米粒子，优选为具有生物兼容性的磁性纳米颗粒，特别是PEG或SiO₂包被的磁性纳米颗粒，特别地，所述磁性纳米颗粒是四氧化三铁纳米粒子。

3.根据权利要求1所述的磁性细胞，其中，

磁性纳米颗粒与细胞的比例为0.3-4pg/细胞，优选0.5-1.5pg/细胞；和/或

通过选自链霉亲和素/生物素偶联反应、脂质体介导、抗原抗体反应中的一种或多种方法，使得磁性纳米颗粒结合到细胞的细胞膜上。

4.根据权利要求1-3任一项所述的磁性细胞，其中，所述磁性细胞采用如下方法一或二制备：

方法一，包括如下步骤：

(1)将偶联生物素的特异性识别细胞膜蛋白的抗体与细胞孵育，以获得带有生物素的细胞，

(2)将所述带有生物素的细胞与链霉亲和素修饰的磁性纳米颗粒孵育，通过链霉亲和素和生物素之间的相互作用将磁性纳米颗粒连接到细胞膜上，

优选地，所述细胞为红细胞，所述特异性识别细胞膜蛋白的抗体为抗Ter119抗体，所述磁性纳米颗粒是具有生物兼容性的四氧化三铁纳米粒子；

方法二，包括如下步骤：将含有转染试剂的溶液与含有磁性纳米颗粒的溶液混合，然后与细胞孵育，使得磁性纳米颗粒结合到细胞的细胞膜上；

优选地，所述转染试剂为脂质体转染剂，例如lipofectamine 2000或3000；

特别地，方法二包括如下步骤：由lipofectamine 3000和HBSS组成混合物A液，由HBSS和磁性纳米颗粒组成混合B液，将混合物A液和混合B液混合，然后与细胞孵育，使得磁性纳米颗粒结合到细胞的细胞膜上。

5.一种磁性细胞的制备方法，其包括使磁性纳米颗粒结合到细胞膜上的步骤。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其中，

所述细胞选自可以进行体外人工修饰的细胞，例如，红细胞、白细胞、血小板、癌细胞、胚胎干细胞、多能诱导干细胞；和/或

所述磁性纳米颗粒的平均直径为100～500nm，优选为200-300nm；和/或

磁性纳米颗粒与细胞的比例为0.3-4pg/细胞，优选0.5-1.5pg/细胞；和/或

所述磁性纳米颗粒是选自铁、钴、镍或其氧化物的纳米粒子，优选为具有生物兼容性的磁性纳米颗粒，特别是PEG或SiO₂包被的磁性纳米颗粒，特别地，所述磁性纳米颗粒是四氧化三铁纳米粒子；和/或

通过选自链霉亲和素/生物素偶联反应、脂质体介导、抗原抗体反应中的一种或多种方法，使得磁性纳米颗粒结合到细胞的细胞膜上。