[发明专利]一种深绿木霉C61

说明书

本发明涉及一种深绿木霉C61，属于微生物技术领域。该深绿木霉（Trichoderma atroviride）C61保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.21035，保藏日期为2020年12月08日，保藏机构地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。本发明还提供了一种深绿木霉C61在降解酚酸及其衍生物中的应用。本发明的深绿木霉C61对浓度分别为100mg/L的9种混合酚酸的降解如下：阿魏酸、苯甲酸、水杨酸及肉桂酸2天完全降解；对羟基苯甲酸、丁香酸及对香豆酸3天完全降解；香草酸、香草醛6天完全降解。同时可有效缓解酚酸及其衍生物对植物的自毒作用，修复连作障碍土壤。

技术领域

本发明涉及微生物的技术领域，具体涉及一种深绿木霉C61。

背景技术

自毒物质是导致连作障碍的主要因素之一，而酚酸及其衍生物是活性较强的一类，其通过植物挥发、淋溶、根系分泌、凋落物及其残体分解等方式释放到土壤环境中，并在土壤中累积，显著改变土壤的理化性质。微生物群落结构和多样性，使土传病原微生物比例升高，植株发病率增加。同时酚酸及其衍生物也影响植物的膜系统、光合作用及体内酶活，从而使植物生长受到抑制。酚酸及其衍生物在连作土壤中的积累特性已在水稻、大豆、花生、黄瓜、中药材及林木等多种植物中被证实，并且一种植物能同时产生多种酚酸类自毒物质，且不同植物产生的酚酸及其衍生物差异较大。

利用微生物分解土壤中的酚酸及其衍生物，从而降低其在土壤中的含量，缓解其对作物的自毒作用，是解决连作障碍的一种有效途径。且微生物降解廉价高效，绿色环保，具有广阔的应用前景。因此，筛选一种能高效降解多种酚酸的菌株并应用于连作障碍土壤修复，具有重要的现实意义。

发明内容

为了克服现有技术存在的上述不足，本发明提供一种深绿木霉C61。本发明的深绿木霉C61能够高效降解对羟基苯甲酸、香草酸、丁香酸、香草醛、对香豆酸、阿魏酸、苯甲酸、水杨酸及肉桂酸，有效缓解酚酸及其衍生物对植物的自毒作用。

一种深绿木霉（Trichoderma atroviride）C61，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC NO. 21035，保藏日期为2020年12月08日，保藏机构地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

一种含深绿木霉C61的孢子悬液的制备方法，所述方法包括将深绿木霉C61菌株接种到PDA平板上，放置于25℃培养箱中生长4-5天，刮取一个平板的孢子，加入无菌水中后，过4层无菌镜头纸，所得滤液即为孢子悬液。

一种含深绿木霉C61的筛选方法，具体筛选方法如下：取1×10⁵个孢子接入到酚酸液体培养基（PDB培养基）中，设不接菌的培养基为对照，置于25℃、150rpm摇床中培养5天；培养结束后，取1mL培养基，10000g离心2min，再取上清200mL加入10mL 0.1%的溴甲酚绿进行显色，根据溶液颜色的深浅，筛选降解率高的菌株，即为深绿木霉C61。

优选的，所述酚酸液体培养基（PDB培养基）的制备方法如下：取土豆200g，蒸馏水煮沸30min，纱布过滤后冷却定容至1L，得到土豆水；取土豆水100mL、蒸馏水900mL、对羟基苯甲酸、香草酸、丁香酸、对香豆酸、阿魏酸、苯甲酸、香草醛、水杨酸及肉桂酸各100mg，混合均匀，配制成酚酸液体培养基，将液体培养基分装入试管中，高压灭菌，得酚酸液体培养基。

一种深绿木霉C61的应用，所述深绿木霉C61用于降解酚酸及其衍生物。

优选的，所述酚酸及其衍生物包括对羟基苯甲酸、香草酸、丁香酸、香草醛、对香豆酸、阿魏酸、苯甲酸、水杨酸或肉桂酸中的至少一种。

一种含深绿木霉C61的孢子悬液或其为有效成分的制剂在缓解酚酸及其衍生物对植物的自毒作用或修复酚酸及其衍生物引起的连作障碍土壤中的应用。