[发明专利]MazF突变体、重组载体、重组工程菌及其应用

权利要求书

1.一种MazF突变体，其特征在于，所述MazF突变体包括：

(a)、由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列缺失、替代或增加一个或多个氨基酸组成的多肽；或，

(b)、与如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的多肽具有至少90％同源性的多肽。

2.根据权利要求1所述的MazF突变体，其特征在于，所述MazF突变体包括：由如SEQ IDNo.2所示的氨基酸序列中第21位氨基酸、第55位氨基酸、第87位氨基酸及第91位氨基酸中的至少一个发生突变得到的多肽。

3.根据权利要求2所述的MazF突变体，其特征在于，所述MazF突变体包括：由如SEQ IDNo.2所示的氨基酸序列发生K21A突变、S55I突变、G87L突变及K91I突变中至少一种得到的多肽。

4.根据权利要求3所述的MazF突变体，其特征在于，所述MazF突变体包括：由如SEQ IDNo.2所示的氨基酸序列发生K21A突变、S55I突变、G87L突变及K91I突变中的任意一种得到的多肽；

或者，所述MazF突变体包括：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列同时发生K21A突变、S55I突变、G87L突变及K91I突变中的任意两种得到的多肽；

或者，所述MazF突变体包括：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列同时发生K21A突变、S55I突变、G87L突变及K91I突变中的任意三种得到的多肽；

或者，所述MazF突变体包括：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列同时发生K21A突变、S55I突变、G87L突变及K91I突变得到的多肽。

5.根据权利要求4所述的MazF突变体，其特征在于，所述MazF突变体的氨基酸序列为如SEQ ID No.3～SEQ ID No.17所示的序列中的一种。

6.根据权利要求1所述的MazF突变体，其特征在于，所述MazF突变体的编码序列包括：

(a)、与如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列组成的多核苷酸具有至少90％同源性的多核苷酸；或，

(b)、由如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列缺失、替代或增加一个或多个碱基得到的多核苷酸。

7.根据权利要求6所述的MazF突变体，其特征在于，所述MazF突变体的核苷酸序列为如SEQ ID No.28～SEQ ID No.42所示的序列中的一种。

8.根据权利要求1-7任一项所述的MazF突变体，其特征在于，所述MazF突变体为可溶性酶、固定化酶或者基因工程酶。

9.一种重组载体，其特征在于，含有权利要求1-8任一项所述的MazF突变体的编码序列。

10.权利要求9所述的重组载体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：采用第一扩增引物对对第一载体进行PCR扩增，得到重组载体，其中，所述第一载体含有如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列对应的编码序列，所述第一扩增引物对含有所述MazF突变体的突变位点对应的核苷酸序列。

11.权利要求10所述的重组载体的制备方法，其特征在于，所述第一扩增引物对选自如下引物对中的至少一对：核苷酸序列如SEQ ID No.20和SEQ ID No.21所示的引物对、核苷酸序列如SEQ ID No.22和SEQ ID No.23所示的引物对、核苷酸序列如SEQ ID No.24和SEQID No.25所示的引物对、核苷酸序列如SEQ ID No.26和SEQ ID No.27所示的引物对。

12.一种重组工程菌，其特征在于，含有权利要求9所述的重组载体。

13.权利要求1-8任一项所述的MazF突变体、权利要求9所述的重组载体或者权利要求12所述的重组工程菌在剪切单链RNA中的应用。