[发明专利]一种雄激素应答元件及其在检测环境雄激素中的用途

说明书

本发明提供了一种雄激素应答元件及其在检测环境雄激素中的用途，属于环境生物技术领域。本发明雄激素应答元件的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还提供了含有该雄激素应答元件的重组质粒载体。本发明还利用该重组质粒载体对类雄激素物质进行检测。本发明可以快速大批量检测空气、土壤、水果蔬菜等的类雄激素物质的含量，对环境中类雄激素物质进行监控。本发明检测十分灵敏，且准确率高，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于环境生物技术领域，具体涉及一种雄激素应答元件及其在检测环境雄激素中的用途。

背景技术

环境中的内分泌干扰物，亦被称为环境激素，是指一些释放到环境中的污染物，它们能够干扰人类和动物激素调节的生理过程，改变内分泌与生殖系统的正常功能，对人类生存和繁衍构成巨大威胁。环境雄激素是环境激素中的一种，是典型的内分泌干扰物之一，属于于类固醇激素，目前已经发现的具有雄激素干扰活性的环境化合物种类繁多，包括氟他胺类、有机氯杀虫剂类、二苯甲烷类、邻苯二甲酸盐类和烷基酚类等。

环境雄激素主要来源于畜禽粪尿的排放以及造纸厂和城市污水处理厂处理不彻底的废水排放，污染源的连续性排放致使环境雄激素物质在各类环境介质中被不断检出。环境雄激素通过食物链进入人体和动物体内，在血液中循环，在脂肪中积累，引起生物体中自身荷尔蒙被扰乱。通过干扰生物体正常的内分泌系统，对水生生物和哺乳动物的生殖发育产生危害，而且还会影响微生物群落的结构与功能，对环境健康和生态安全构成严重威胁。

目前，有关环境雄激素污染的监测已经有相关研究，测评环境雄激素的方法有许多，如Hershberger试验、青春期雄鼠试验、雄激素受体结合试验、雄激素依赖细胞增殖筛选试验、雄激素依赖基因转录试验等。国内有学者应用雄激素配体-受体结合特性，开发了一种环境类雄激素的ELISA定量检测方法(专利编号200910191914.X)。但这些方法都比较繁琐，特别是雄激素受体-配体结合的方法不能准确反应激素的生物学活性，难以可靠地对环境中雄激素进行检测。

环境雄激素在环境中广泛存在，污染源较多，它们在环境中的含量很低，并且由于环境样品的复杂性使得对其检测条件要求高。因此，迫切需要建立一种简单、快速、准确、稳定、灵敏度高的环境雄激素的检测方法，为全面掌握各种环境介质中的雄激素残留以及污染风险提供技术保障。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种雄激素应答元件及其在检测环境雄激素中的用途。

本发明提供了一种雄激素应答元件，它的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

本发明还提供了一种启动子，它的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

本发明还提供了一种核苷酸序列，所述核苷酸序列包含SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列和SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列。

进一步地，所述核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

本发明还提供了一种重组载体：它包含SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列；

优选地，它包含SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列。

进一步地，前述的重组载体包含SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。

进一步地，所述重组载体为重组原核真核穿梭载体；

优选地，所述原核载体为pGL4.10[luc2]载体。

本发明还提供了一种重组细胞，它包含前述的重组载体。

本发明还提供了前述的雄激素应答元件、包含SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示核苷酸序列的核苷酸序列、SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列、前述的重组载体、前述的重组细胞在检测环境雄激素中的应用。