[发明专利]分泌抗FGL1单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用

说明书

本发明提供了分泌抗FGL1单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用，所述分泌抗FGL1单克隆抗体的杂交瘤细胞株分别命名为鼠抗人FGL1单克隆抗体杂交瘤细胞系MJ9‑1和鼠抗人FGL1单克隆抗体杂交瘤细胞系MJ9‑4，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号分别为CGMCC No.23015和CGMCC No.23016，保藏日期为2021年7月19日。所述杂交瘤细胞株分泌的抗FGL1单克隆抗体具有良好的灵敏度与特异性，与原核、真核来源的FGL1蛋白均具有良好的亲和性，可制备成ELISA检测、蛋白免疫印迹检测以及化学发光检测产品，具有实际应用的价值。

技术领域

本发明属于免疫化学、肿瘤生物学和细胞生物学技术领域，尤其涉及分泌抗FGL1单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用。

背景技术

抑制受体（IRs）的上调表达对于平衡共刺激受体活性和限制T细胞激活至关重要，可以防止自身免疫、自身炎症和组织损伤。然而，肿瘤可以劫持这些免疫检查点的作用，对CD4+和CD8+T细胞诱导的抗肿瘤免疫反应产生保护作用。最近的癌症免疫治疗方法通过靶向抑制受体来克服免疫耐受，重新激活细胞毒性T细胞对肿瘤的反应，从而逆转这种衰竭。

Hepassocin，又称肝细胞源性纤维蛋白原相关蛋白1（HFREP-1）和纤维蛋白原样蛋白1（FGL1），是一种肝脏特异性分泌蛋白，是EREP蛋白家族的一员，主要在肝脏中表达，并首次从人肝细胞癌中克隆得到。人成纤维蛋白原家族（FREP）信号通路在癌症的发生进程和调节免疫细胞功能方面发挥着关键作用。

人FGL1蛋白为分泌蛋白，共含有312个氨基酸，包括22个氨基酸信号肽和290个氨基酸成熟蛋白质。淋巴细胞激活基因3（LAG3）为免疫抑制受体，其配体为主要组织相容性复合体II型（MHC-II），此外FGL1独立于MHC-II，是LAG3的主要功能配体（Wang et al.Fibrinogen-like Protein 1 Is a Major Immune Inhibitory Ligand of LAG-3，Cell(2019)，https://doi.org/10.1016/j.cell.2018.11.010）。

FGL1能够抑制抗原特异性T细胞激活，其在癌症患者血浆中的表达升高表明治疗效果预后不良。除了在癌症进展中的作用，FGL1对肝细胞也有恢复功能，其在部分肝切除术后、肝再生过程中表达量上升，并能刺激原代肝细胞摄取3H-胸苷，促进肝细胞增殖，对爆发性肝衰竭大鼠损伤的肝脏有保护作用（Yu, HT.et al. (2009) J. Biol. Chem.284：13335.）。上述研究表明，FGL1在肝再生和肝保护中起着重要作用。因此，制备一种高特异性和灵敏度的FGL1抗体及FGL1检测试剂盒在临床诊断中具有重要的意义。

目前，市面上能够特异性并高灵敏度地检测FGL1的抗体及相关试剂盒极少。提供特异性强、灵敏度高、应用范围广的抗FGL1单克隆抗体及检测试剂盒，已成为亟待解决的问题。

发明内容

针对现有技术的不足和实际需求，本发明提供分泌抗FGL1单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用，所述杂交瘤细胞可以分泌高灵敏度、强特异性的单克隆抗体，与FGL1蛋白具有良好的亲和能力，在相关的检测中具有重要的应用价值。

为达此目的，本发明采用如下技术方案：

第一方面，本发明提供了分泌抗FGL1单克隆抗体的杂交瘤细胞株，所述分泌抗FGL1单克隆抗体的杂交瘤细胞株命名为鼠抗人FGL1单克隆抗体杂交瘤细胞系MJ9-1，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.23015，保藏日期为2021年7月19日。