[发明专利]一株来源于溶藻弧菌噬菌体的裂解酶及其应用

权利要求书

1.噬菌体的裂解酶基因holA和lysin的共表达载体，其特征在于，所述共表达载体通过将噬菌体基因组DNA作为模板，分别以基因holA的引物对和基因lysin的引物对进行PCR扩增，得到基因holA片段和基因lysin片段，将基因holA片段和基因lysin片段融合，然后与载体连接即得。

2.根据权利要求1所述的噬菌体的裂解酶基因holA和lysin的共表达载体，其特征在于，所述噬菌体为噬菌体HH109，所述载体为pET32a或pMMB207。

3.根据权利要求1所述的噬菌体的裂解酶基因holA和lysin的共表达载体，其特征在于，所述基因holA的引物对包括上游引物holA-F1和下游引物holA-R1；或上游引物holA-F2和下游引物holA-R2；其中，所述上游引物holA-F1序列如SEQ ID NO：1所示，所述下游引物holA-R1序列如SEQ ID NO：2所示，所述上游引物holA-F2序列如SEQ ID NO：5所示，所述下游引物holA-R2序列如SEQ ID NO：6所示。

4.根据权利要求1所述的噬菌体的裂解酶基因holA和lysin的共表达载体，其特征在于，所述基因lysin的引物对包括上游引物lysin-F1和下游引物lysin-R1；或上游引物lysin-F2和下游引物lysin-R2，其中，所述上游引物lysin-F1序列如SEQ ID NO：3所示，所述下游引物lysin-R1序列如SEQ ID NO：4所示，所述上游引物lysin-F2序列如SEQ ID NO：7所示，所述下游引物lysin-R2序列如SEQ ID NO：8所示。

5.含有权利要求1~4任一项所述的共表达载体的重组菌株。

6.根据权利要求5所述的重组菌株，其特征在于，所述重组菌株为大肠杆菌BL21、溶藻弧菌菌株E110和不敏感溶藻弧菌E601或HN198菌株中的一种。

7.噬菌体共表达裂解酶holA-lysin，其特征在于，所述噬菌体裂解酶holA-lysin是将权利要求5或6所述的重组菌株进行诱导表达后得到。

8.权利要求7所述的噬菌体共表达裂解酶holA-lysin的制备方法，其特征在于，包括以下制备步骤：将权利要求5或6所述的重组菌株进行诱导表达后得到。

9.权利要求1~4任一项所述的共表达载体、权利要求5或6所述的重组菌株、权利要求7所述的噬菌体共表达裂解酶holA-lysin在细菌裂解中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述细菌为大肠杆菌或溶藻弧菌。