[发明专利]一种精液中与无精子症有关的分子标志物及其检测方法和应用

说明书

本发明涉及一种精液中与无精子症有关的分子标志物及其检测方法和应用，属于分析化学及临床医学技术领域。本发明通过采用UPLC‑Qexactive MS比较正常对照和无精子症精液中的代谢小分子，发现了精液中存在可用于评估是否患有无精子症的具有诊断价值的1,3‑二羟基丙‑2‑基13‑甲基十四酸，以及检测该物质的UPLC‑Q exactive MS的应用，研制出可便于临床应用的无精子症诊断、监测试剂盒。代谢小分子是一种新型生物标志物，其与疾病结局关联强、稳定、无创、易于检测、定量精确。本发明提供的1,3‑二羟基丙‑2‑基13‑甲基十四酸可用作无精子症的诊断标志物，为临床医生进一步检查提供依据，为快速准确掌握患者的疾病状态、及时采取防治方案提供支持，延缓和阻止疾病进展。

技术领域

本发明涉及一种精液中与无精子症有关的分子标志物及其检测方法和应用，属于分析化学及临床医学技术领域。

背景技术

据世界卫生组织(WHO)统计全世界约有15％的育龄夫妇遭受不育的困扰。我国由于人口基数大,新婚夫妇中不孕不育的患者人数远超过百万,因男性因素导致的不育高于50％。不孕不育是全球普遍存在的夫妻之间的问题，据估计有4-17％的夫妻会就诊以纠正他们的不孕不育，但通常认为，更多的不孕不育夫妇不会去诊疗。调查显示，男性因素为主要或唯一因素的占不孕不育原因的20-50％左右。无精子症的发生率占男性不育症的10％-20％。传统的精液参数检查只关注精子数量、运动度、精液量、pH和液化时间等常规参数,不能全面地反应精液的全部状况。除此之外因为受到禁欲时间等因素的影响,常规精液参数常规分析结果还表现为较大的波动性。因而,临床诊断往往需要参考多次精液常规分析,给医生和患者带来了负担。因而,临床上亟需用于特发性男性不育的新的诊断方法。

代谢组学(metabonomics)是以组群指标分析为基础,以高通量检测和数据处理为手段,以信息建模与系统整合为目标的系统生物学的一个分支,是继基因组学、转录组学、蛋白质组学、后系统生物学的新的另一重要研究领域。精浆作为精液的液体成分可以很好地反映精液的质量,而且具有无创,容易采集的优点.然而,采用代谢组学分析精浆代谢小分子在特发性男性不育的诊断监测中的应用还未得到相应的关注。LC-MS具有样本处理简单,灵敏度高,临床实用性强的特点.UPLC-Q exactive MS是新一代高分辨质谱与超高效液相的组合,具有相比传统LC-MS更强的灵敏度、特异度和稳定性。故而采用UPLC-Q exactiveMS进行精浆代谢小分子的代谢组学分析,若能发现稳定的与特发性男性不育发病相关的特异精浆代谢小分子,并将其作为特发性男性不育的生物标志物,并研发相应的代谢小分子标志的UPLC-Qexactive MS检测方法,将为男性生殖健康做出巨大贡献。

发明内容

本发明的一个目的在于提供一种与无精子症提供相关的分子标志物1,3-二羟基丙-2-基13-甲基十四酸。

本发明另一个目的是为将分子标志物1,3-二羟基丙-2-基13-甲基十四酸用于无精子症诊断提供基于UPLC-Q exactive MS的应用。

本发明再有一个目的是为上述分子标志物1,3-二羟基丙-2-基13-甲基十四酸提供色谱质谱用检测和诊断试剂盒。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：一种精液中与无精子症有关的分子标志物，所述分子标志物为1,3-二羟基丙-2-基13-甲基十四酸。

本发明还提供一种使用如上所述的分子标志物1,3-二羟基丙-2-基13-甲基十四酸在制备以精液为检测样本的无精子症诊断或监测试剂中的应用。

本发明再提供一种使用如上所述的分子标志物1,3-二羟基丙-2-基13-甲基十四酸制备的无精子症诊断或监测试剂盒，包括：

1,3-二羟基丙-2-基13-甲基十四酸标准品；

内标A：肌酐﹑缬氨酸、烟酸、胸腺密啶、戊二酸、L-苯基丙胺酸、N-乙酰对氨基酚、马尿酸八种物质的氛标同位素内标；