[发明专利]一种基于空心聚合物套管结合Zr-MOF的不同信号放大能力的移液器免疫传感平台在审
申请号: | 202210075937.X | 申请日: | 2022-01-23 |
公开(公告)号: | CN114460291A | 公开(公告)日: | 2022-05-10 |
发明(设计)人: | 陈翊平;洪锋;李乐天;肖睿恒;鲁鹏;胡筱波 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | G01N33/553 | 分类号: | G01N33/553;G01N33/543;G01N33/58 |
代理公司: | 宜昌市三峡专利事务所 42103 | 代理人: | 王玉芳 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 空心 聚合物 套管 结合 zr mof 不同 信号 放大 能力 移液器 免疫 传感 平台 | ||
1.一种基于空心聚合物套管结合Zr-MOF的不同信号放大能力的移液器免疫传感平台,其特征在于,以空心聚合物套管作为基底,在空心聚合物套管内壁包被生物识别分子,实现了各种大分子、小分子目标物的检测。
2.如权利要求1所述的基于空心聚合物套管结合Zr-MOF的不同信号放大能力的移液器免疫传感平台,其特征在于:
所述生物识别分子为捕获抗体或检测抗体、抗体或抗原、DNA捕获探针或DNA检测探针;
所述目标物包括病毒、生物标志物、抗生素分子、农药分子、兽药分子、生物毒素、细菌或其他;还包括各种基质成分的检测对象如血清、牛奶、饮料、粮食谷物或其他;
所述空心聚合物套管是材质为聚苯乙烯,聚碳酸酯,聚丙烯酰胺、聚甲基丙烯酸甲酯、聚二甲基硅氧烷或聚对苯二甲酸乙二醇酯或其他。
3.权利要求1-2所述的基于空心聚合物套管结合Zr-MOF的不同信号放大能力的移液器免疫传感平台的操作方法,其特征在于:所述方法包括以下步骤:
S1:空心聚合物套管依次进行与生物识别分子温育过夜、洗涤、牛血清蛋白封闭;
S2:上述研制生物分子修饰空心聚合物套管依次吸入待测目标物进行生物反应,反应后排出溶液并洗涤空心聚合物套管,加入酶标抗体或Zr-MOF-Pt-HRP酶标抗体或Zr-MOF-Pt-HRP-HRP酶标抗体-引发链进行反应,洗涤过量的酶标抗体或Zr-MOF-Pt-HRP酶标抗体或Zr-MOF-Pt-HRP-HRP酶标抗体-引发链后;
S3:吸入信号产生底物进行颜色变化后予以硫酸终止反应,对最终颜色进行拍照并以颜色分析软件分析颜色强度,颜色强度与待测目标物浓度相关,或者在加入酶标抗体反应后,洗涤掉过量的酶标抗体,然后吸入发光底物进而产生信号,结合CCD拍照成像系统进行定量分析靶标,光强度与待测目标物浓度相关。
4.如权利要求3所述的基于空心聚合物套管结合Zr-MOF的不同信号放大能力的移液器免疫传感平台的操作方法,其特征在于:所述Zr-MOF-Pt-HRP酶标抗体是按如下方法制备;
Zr-MOF是通过如下合成的:将 H2TCPP、ZrOCl2·8H2O和苯甲酸溶解在DMF中并加入到玻璃瓶中;搅拌得到Zr-MOF产物;并离心,用DMF洗涤,在真空烘箱中干燥;
Zr-MOF-Pt通过在Zr-MOF上原位还原法合成:将Zr-MOF分散在水中,然后在悬浮液中加入H2PtCl6搅拌,随后,将NaBH4溶液滴入悬浮液中搅拌,最终将Zr-MOF-Pt产物进行离心,用水洗涤,最后分散在水中,得到Zr-MOF-Pt;
Zr-MOF-Pt-HRP酶标抗体的制备:在Zr-MOF-Pt中加入HRP酶标抗体反应;然后,用PBS洗涤并离心,得到Zr-MOF-Pt-HRP酶标抗体。
5.如权利要求4所述的基于空心聚合物套管结合Zr-MOF的不同信号放大能力的移液器免疫传感平台的操作方法,其特征在于:所述Zr-MOF-Pt-HRP-HRP酶标抗体-引发链是按如下方法制备:将Zr-MOF-Pt与HRP溶液一起孵;接下来,加入HRP酶标抗体和磷酸化杂交链反应引发链DNA温育得到Zr-MOF-Pt-HRP-HRP酶标抗体-引发链。
6.如权利要求5所述的基于空心聚合物套管结合Zr-MOF的不同信号放大能力的移液器免疫传感平台,其特征在于:所述杂交链反应放大系统为生物素化的双发卡DNA。
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