[发明专利]一种利用蛋白核小球藻荧光检测阿特拉津生物毒性的方法

权利要求书

1.一种利用蛋白核小球藻荧光检测阿特拉津生物毒性的方法，其特征在于，在植物油条件下利用蛋白核小球藻检测阿特拉津生物毒性，所述植物油为甲基化和乙基化植物油；

所述方法包括以下步骤：取系列浓度阿特拉津标准液，加入植物油溶液，再加入到蛋白核小球藻藻液中，混匀，控制蛋白核小球藻藻液、植物油溶液和阿特拉津标准溶液的体积比为1：(1-2)：(1-2)，经暗置10min后，测定蛋白核小球藻的各叶绿素荧光动力学参数，测定阿特拉津的生物毒性；

所述蛋白核小球藻液为将蛋白核小球藻藻种接种至培养基后置于恒温光照培养箱中培养至对数期得到；

所述培养基由以下组分组成：NaNO₃1.5g/L、K₂HPO₄0.04g/L、MgSO₄·7H₂O0.075g/L、CaCl₂·2H₂O0.036g/L、柠檬酸0.006g/L、柠檬酸铁铵0.006g/L、EDTA0.001g/L、Na₂CO₃0.02g/L、H₃BO₄2.86g/L、MnCl₂·4H₂O1.86g/L、ZnSO₄·7H₂O0.22g/L、Na₂MoO₄·2H₂O0.39g/L、CuSO₄·5H₂O0.079g/L、Co(NO₃)2·6H₂O0.049g/L、维生素B₁₂0.5mg/L、维生素B₁0.1mg/L；

所述恒温光照培养箱的培养条件为：在光照度2000-2500lx、温度25±2℃、湿度75％RH、光暗周期12h：12h的条件下静置培养，所述对数期的蛋白核小球藻，为转接过程中由初始值OD₆₈₀＝0.1于培养箱中培养生长，随后选定OD₆₈₀＝1.0即通过显微镜镜检得出藻细胞密度，此时细胞密度范围在(1-1.2)×10⁶ind/mL的蛋白核小球藻藻液浓度作为检测阿特拉津生物毒性的藻的浓度，用于阿特拉津生物毒性的测定。

2.根据权利要求1所述的一种利用蛋白核小球藻荧光检测阿特拉津生物毒性的方法，其特征在于，所述植物油溶液与所述阿特拉津标准液的体积比为1：1、1：2或2：1。

3.根据权利要求1所述的一种利用蛋白核小球藻荧光检测阿特拉津生物毒性的方法，其特征在于，所述测定蛋白核小球藻的各叶绿素荧光动力学参数时，使用荧光光谱仪进行测试，荧光激发波长发射波长为680nm。

4.根据权利要求1所述的一种利用蛋白核小球藻荧光检测阿特拉津生物毒性的方法，其特征在于，所述测定阿特拉津的生物毒性时，以培养基代替阿特拉津标准溶液作为空白对照组。

5.根据权利要求1所述的一种利用蛋白核小球藻荧光检测阿特拉津生物毒性的方法，其特征在于，所述动力学参数包括PSⅡ最大光能转化效率、PSⅡ实际光能转化效率、光合电子传递效率、光化学淬灭、非光化学淬灭。

6.根据权利要求1所述的一种利用蛋白核小球藻荧光检测阿特拉津生物毒性的方法，其特征在于，所述系列浓度的阿特拉津标准液的浓度依次为20μg/L、40μg/L、60μg/L、80μg/L、100μg/L。