[发明专利]特异性结合相思子毒素的单克隆抗体及其应用

说明书

本发明公开了特异性结合相思子毒素的抗体或其活性片段、检测所述相思子毒素的试剂盒及其应用。本发明的检测试剂盒生产方便，效果稳定，无非特异反应，包被量低，有利于大批量生产。本发明的方法操作简便快捷、重现性好、极其方便现场使用。

技术领域

本发明涉及免疫领域，具体涉及相思子毒素的纯化、特异性结合相思子毒素的抗体以及检测相思子毒素的试剂盒及应用。

背景技术

相思子毒素是从豆科藤本植物相思子(Abrus precatorius)的种子中提取的一种剧毒性高分子蛋白毒素，具有极强的细胞毒性作用，可引起意外中毒，对公共安全存在潜在威胁，已被列为潜在的重要毒素战剂和生物恐怖病原物质之一。相思子毒素中毒后，通常要经数小时至数天的潜伏期才出现综合征。经静脉注射或皮下给药，临床症状与经消化道给药相似，但胃肠道症状较轻，而注射部位通常会发生严重的炎症。

相思子毒素是一种分子质量约为63ku～67ku的糖蛋白，分子由 A、B两条多肽链通过1个二硫键连接而成。完整毒素在SDS-PAGE 分析时呈一条蛋白带，经二巯基乙醇处理后，A、B两条链分离开。有关试验表明，相思子毒素两条链经二巯基乙醇还原分离开后，其活性并不丧失。

胶体金侧向免疫层析技术已被广泛的应用于毒素检测领域，操作简便、快速，不需额外设备，特别适合现场检测，其检测试纸的准确性高度依赖于抗体的特异性。

因此，开发和建立特异、灵敏的检测相思子毒素的方法是十分迫切和重要的。

发明内容

本发明的第一个目的是提供特异性结合相思子毒素的抗体及其活性片段。

具体而言，本发明提供的抗体或活性片段包含至少一个重链可变区和至少一个轻链可变区，其中：

所述重链可变区具有SEQ ID NO:3所示的CDR1，SEQ ID NO: 4所示的CDR2和/或SEQ ID NO:5所示的CDR3；或者，所述重链可变区具有SEQ ID NO:13所示的CDR1，SEQ IDNO:14所示的 CDR2和/或SEQ ID NO:15所示的CDR3；

所述轻链可变区具有SEQ ID NO:8所示的CDR1，SEQ ID NO: 9所示的CDR2和/或SEQ ID NO:10所示的CDR3；或者，所述轻链可变区具有SEQ ID NO:18所示的CDR1，SEQ IDNO:19所示的 CDR2和/或SEQ ID NO:20所示的CDR3。

作为本发明的一种优选方案，所述抗体中，所述重链可变区具有 SEQ ID NO:3所示的CDR1，SEQ ID NO:4所示的CDR2和/或SEQ ID NO:5所示的CDR3；所述轻链可变区具有SEQ ID NO:8所示的 CDR1，SEQ ID NO:9所示的CDR2和/或SEQ ID NO:10所示的 CDR3。

作为本发明的一种优选方案，所述抗体中，所述重链可变区具有 SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，或SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列经过一个或多个氨基酸添加、删除、替换或修饰获得的保守性变异体；所述轻链可变区具有SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列，或SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列经一个或多个氨基酸添加、删除、替换或修饰获得的保守性变异体。

作为本发明的一种优选方案，所述抗体中，所述重链可变区具有 SEQ ID NO:13所示的CDR1，SEQ ID NO:14所示的CDR2和/或 SEQ ID NO:15所示的CDR3；所述轻链可变区具有SEQ ID NO:18 所示的CDR1，SEQ ID NO:19所示的CDR2和/或SEQ ID NO:20所示的CDR3。