[发明专利]一种人源超氧化物歧化酶hSOD1突变体的制备及其应用

权利要求书

1.一种人源超氧化物歧化酶hSOD1突变体的基因，其特征在于，命名为Mt1SOD1，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

2.含有权利要求1所述基因的表达载体pET-28a-Mt1SOD1。

3.一种含有权利要求2所述载体pET-28a-Mt1SOD1的BL21(DE3)-pET28a-Mt1SOD1工程菌。

4.权利要求1所述基因编码得到的重组Mt1SOD1突变体蛋白，其氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示。

5.一种重组人源超氧化物歧化酶hSOD1突变体Mt1SOD1的制备方法，其特征在于，所述突变体Mt1SOD1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，步骤如下：

(1)NCBI获取序列，进行密码子优化，5’端添加6×His-tag标签，化学合成5’端具有6×His-tag编码序列的hSOD1、Mt1SOD1基因；

(2)测序验证；

(3)将hSOD1、Mt1SOD1基因片段克隆至pET-28a+质粒；

(4)构建pET-28a-Mt1SOD1表达质粒；

(5)获得BL21(DE3)-pET28a-SOD1目的基因工程菌；

(6)利用大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达，利用BL21(DE3)-pET28a-SOD1工程菌在25℃，1mMIPTG，800μMCu²⁺，20μMZn²⁺条件下诱导16h分别表达野生型hSOD1及突变型Mt1SOD1。

6.一种重组人源超氧化物歧化酶hSOD1突变体Mt1SOD1的应用，所述突变体Mt1SOD1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其特征在于，应用于功能型抗衰化妆品的开发或应用于其他抗衰产品的开发。

7.如权利要求6所述重组人源超氧化物歧化酶hSOD1突变体Mt1SOD1的应用，其中所述其他抗衰产品是功能食品或抗衰药品。