[发明专利]滑子菇优良菌株及其特异性分子标记与应用

说明书

本发明公开了滑子菇优良菌株及其特异性分子标记与应用。该优良菌株为产量高、出菇快且抗病能力强的滑子菇682(保藏编号CGMCCNo:23243)。滑子菇682菌丝生长快，后熟期短，出菇快，菇蕾密集，菇蕾成活率在80％以上，菌盖浅黄色至黄褐色，适应能力强，采收周期短；生物转化率高；抗病原菌能力强，对哈茨木霉、扩展青霉和镰刀菌均有很强的拮抗能力。本发明通过野生标本分离得到了滑子菇菌株682，开发了食用菌新品种，并获得了滑子菇682的特异DNA序列和特有的酶切位点，对于保护该物种种质资源，丰富食用菌品种资源等具有重要意义。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体地说，涉及滑子菇优良菌株及其特异性分子标记与应用。

背景技术

滑子菇(Pholiota microspora)属于真菌界、担子菌门、伞菌纲、伞菌目、球盖菇科、鳞伞属。别名滑菇、珍珠菇、珍珠蘑、滑子蘑、光帽鳞伞。滑子菇具有极高的食用和营养价值，其中含有丰富的营养物质，如粗蛋白、粗纤维、多糖、脂肪、矿物质、灰分、维生素等，具有抗肿瘤、抗氧化和增强免疫力等作用。滑子菇是世界菇类交易市场的十大菇类之一，也是联合国粮农组织(FAO)向发展中国家推荐栽培的食用菌种类之一。滑子菇颜色艳丽、菇肉脆嫩、味道鲜美，具有滑、鲜、嫩、脆的特点，营养十分丰富，是汤料的美好添加品，颇受人们欢迎，而且菇盖表面分泌的粘状物，具有抑制肿瘤的功效，能提高机体免疫力，对增进人体的脑力和体质大有益处，是一种低热量、低脂肪的保健食品。

目前国内滑子菇主产区的品种主要为早丰112和C3，多年来菌种一直未有更新，而且原有菌种逐渐老化，出菇能力减弱，菇蕾数在逐渐减少。滑子菇虽然易于栽培，但其菌种老化问题尚未得到妥善解决，亟需对其进行菌种改良，促进滑子菇产业的发展。

发明内容

本发明的目的是提供滑子菇优良菌株及其特异性分子标记与应用。

为了实现本发明目的，第一方面，本发明提供一种滑子菇(Pholiota microspora)682，菌株682是从采自西藏墨脱的野生滑子菇子实体通过分离纯化、驯化培养获得的产量高、抗病能力强的滑子菇菌株。菌株682现已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101，保藏编号CGMCC No:23243，保藏日期2021年8月27日。

第二方面，本发明提供滑子菇682的特异性DNA分子标记，核苷酸序列如SEQ IDNO:4所示。

第三方面，本发明提供用于检测滑子菇682的PCR引物，包括如SEQ ID NO:1所示的上游引物和如SEQ ID NO:2所示的下游引物。

第四方面，本发明提供滑子菇682的检测方法，利用引物对SEQ ID NO:1和SEQ IDNO:2进行检测；利用XbaI对滑子菇682的特异性DNA分子序列进行酶切。

所述方法包括：提取待测滑子菇的基因组DNA作为模板，利用上、下游引物进行PCR扩增，若扩增产物中包含SEQ ID NO:4所示的特异性DNA分子标记以及特异性DNA分子标记上特有的酶切位点则判定待测滑子菇为滑子菇682。

第五方面，本发明提供滑子菇682在抗病原菌以及由病原菌导致的植物病害中的应用。

所述病原菌包括但不限于哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、扩展青霉(Penicillium expansum)和镰刀菌(Fusarium sp.)。

第六方面，本发明提供滑子菇682作为亲本在进行杂交育种(开发滑子菇新品种)、基因改造中的应用。

第七方面，本发明提供滑子菇682的栽培方法，包括以下步骤：