[发明专利]一种能够降解敌草隆的菌株及其应用

说明书

本发明公开了一种能够降解敌草隆的菌株及其应用。该菌株为链格孢属(Alternaria sp.)菌株QHSH‑5，其保藏号为CGMCC No.23258。该菌株可用于农药敌草隆的降解，有助于解决农业敌草隆残留问题，提高农产品质量安全。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，涉及一种能够降解敌草隆的菌株及其应用。

背景技术

敌草隆(Diuron)是一种选择性除草剂，难溶于水、也不易溶于大多数有机溶剂，在空气中化学性质稳定，遇强酸强碱可被分解，不燃烧，无腐蚀性，分子量为：233.0945，分子式为：C₉H₁₀Cl₂N₂O，化学结构式如下：

随着我国成为农药生产大国，敌草隆在国内的生产和使用也迅速增长，敌草隆应用于棉花、玉米、花生、甘蔗、果树；防除马塘、旱稗、狗尾草、莎草、蓼、藜等一年生杂草，对多年生杂草，如狗牙根，香附子等也有很好的防治效果。目前我国甘蔗用敌草隆的需求量在1500吨左右。由于敌草隆的大量使用，地下水和土壤都存在敌草隆残留，它虽是低毒性除草剂，但误服仍会出现中毒症状，并对上呼吸道有刺激性作用，人经口最小致死量为500mg/kg。已有研究表明敌草隆是一种内分泌干扰物，接触后会对人体产生为不利影响。

在农药的使用中，绝大多数农药都进入空气、水体、土壤中，由于只有少部分挥发，因此在水体、土壤中造成大量的农药残留。而在当前的农药残留降解方法中，微生物的降解作用相较于传统的降解方法具有独特的优势，它可以将农药进行生物修复和分解，使其转化为简单无机物，并且具有安全、高效、快速、廉价、无二次污染的特点。而分离筛选出具有降解作用的菌株将有利于解决农药残留问题，提高农产品质量，促进农业发展。

发明内容

为解决上述问题，本发明目的在于提供一种对敌草隆具有降解作用的菌株。该菌株能有效降解农药敌草隆，为敌草隆残留问题的解决奠定基础，能够改善土壤和水等的环境。

为实现上述目的，本发明提供了链格孢属(Alternaria sp.)菌株QHSH-5，其保藏号为CGMCC No.23258。

菌株QHSH-5的培养特征为，商用马丁真菌培养基28℃，培养3d，菌落形态呈圆形，干燥易挑，不透明，绒毛状，表面有白色菌丝。

本发明的链格孢菌(Alternaria sp.)菌株QHSH-5是按如下方法筛选到的，

1.菌株的分离纯化与筛选

自敌草隆污染土壤中，通过梯度稀释、平板划线等方法，分离纯化出单一微生物菌株，用于后续实验。

将单一微生物菌株分别接种至培养基中，28℃，180r/min摇床内振荡培养，此为实验组，并设置自身对照组和标准对照组。待菌株生长至对数生长期，向实验组以及标准对照组加入敌草隆，浓度为50mg/L，28℃，180r/min分别取样进行薄层分析观察其对农药的降解效果，选取具有降解效果的菌株编号为QHSH-5，作为下一步研究对象。

2.QHSH-5的鉴定

(1)形态学鉴定

将菌株QHSH-5接种到商用马丁固体平板上28℃培养3d，观察其菌落形态。菌落形态呈圆形，干燥，不透明，绒毛状表面有白色菌丝(见图1)。

(2)分子生物学鉴定

提取菌株基因组DNA，以提取的基因组为模板进行PCR扩增、测序。将菌株测得的ITS序列在NCBI数据库中利用BLAST进行比对分析，并选择同源性较高的相关序列利用MAGE7.0软件构建系统发育树及分析进化关系(见图2)。