[发明专利]一种四种肠道病毒的核酸检测试剂盒、引物探针组及检测方法在审

申请号：	202210098940.3	申请日：	2022-01-27
公开（公告）号：	CN114410842A	公开（公告）日：	2022-04-29
发明（设计）人：	陈伟珊;孙江山;吴纯阳	申请（专利权）人：	广州生凌医疗科技有限公司
主分类号：	C12Q1/70	分类号：	C12Q1/70;C12Q1/6858;C12N15/11
代理公司：	南昌逸辰知识产权代理事务所(普通合伙) 36145	代理人：	刘林艳
地址：	510000 广东省广州市增城***	国省代码：	广东;44
权利要求书：	查看更多	说明书：	查看更多
摘要：
搜索关键词：	一种肠道病毒核酸检测试剂盒引物探针方法
钻瓜网技术展会专利词库专利权人专利榜在售专利公布日期热门专利

【权利要求书】：

1.肠道病毒EV、EV71、CA16、CA6的引物探针组，其特征在于：

其中，EV的上游引物为序列EV-F1、EV-F2；下游引物为序列EV-R，特异性探针为序列EV-P，其中上游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2所示；下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示；特异性探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示；

EV71的上游引物为序列EV71-F；下游引物为序列EV71-R，特异性探针为序列EV71-P，其中上游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:5所示；下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示；特异性探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:7所示；

CA16的上游引物为序列CA16-F；下游引物为序列CA16-R，特异性探针为序列CA16-P，其中上游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:8所示；下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:9所示；特异性探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:10所示；

CA6的上游引物为序列CA6-F；下游引物为序列CA6-R，特异性探针为序列CA6-P1、CA6-P2，其中上游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:11所示；下游引物的核苷酸序列如SEQID NO:12所示；特异性探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14所示。

2.肠道病毒EV、EV71、CA16、CA6的四重核酸检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括如权利要求1所述的引物探针组。

3.根据权利要求2所述的肠道病毒EV、EV71、CA16、CA6的四重核酸检测试剂盒，其特征在于，所述肠道病毒EV的特异性探针序列的5’端用ROX修饰，3’端用BHQ2修饰；所述EV71的特异性探针序列的5’端用CY5修饰，3’端用BHQ2修饰；所述CA16的特异性探针序列9的5’端用JOE修饰，3’端用BHQ1修饰；所述CA6的特异性探针序列的5’端用FAM修饰，3’端用BHQ1修饰。

4.根据权利要求2所述的肠道病毒EV、EV71、CA16、CA6的四重核酸检测试剂盒，其特征在于，由荧光PCR检测反应液、权利要求1所述的引物探针组混合液、酶混合液、阳性对照品、阴性对照品组成。

5.根据权利要求4所述的肠道病毒EV、EV71、CA16、CA6的四重核酸检测试剂盒，其特征在于，成分如下所示：

(1)RT-PCR反应液：包括荧光PCR缓冲液、dNTP、DEPC水；

(2)引物探针混合液：包括权利要求1所述的引物探针组；

(3)混合酶液：包括RNA酶抑制剂、逆转录酶、DNA聚合酶；

(4)阳性对照：包括含权利要求1所述引物探针组的扩增目的片段的EV、EV71、CA16、CA6源性RNA；

(5)阴性对照：为TE溶液。

6.根据权利要求2所述的肠道病毒EV、EV71、CA16、CA6的四重核酸检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒于-20℃避光储存。

7.根据权利要求2所述的肠道病毒EV、EV71、CA16、CA6的四重核酸检测试剂盒，其特征在于，其中正向引物、反向引物、特异性荧光探针的摩尔比为：

EV：200：200：160；

EV71：400：200：600；

CA16：200：300：600；